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还原六价铬细菌及其还原酶的研究

中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology,2012,32(4):5359 还原六价铬细菌及其还原酶的研究 1,2 2 1 2 魏 斐  杨丽荣  薛保国  吴 坤 (1河南省农科院植物保护研究所 河南省农作物病虫害防治重点试验室 郑州 450002) (2河南农业大学生命科学学院 郑州 450002) 摘要 从活性污泥中筛选出的C2苏云金芽孢杆菌,能耐受250mg/L的六价铬,并具有较好的还 2+ 2+ 2+ 原能力。研究表明木糖、果糖、玉米饼粉、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸及 Cu 、Fe 、Ca 离子对C2 菌的还原有积极作用,菌体的接种量影响还原的速率。C2菌还原的最适温度为37℃,最适 pH 2+ 2+ 2+ 为9.0;六价铬还原酶的最适pH为7.0、温度为37℃,Co 、Cu 、Fe 、DTT、NADH对酶的还原有 积极影响。 关键词 C2菌 六价铬 还原酶 中图分类号 Q819 [3]   铬污染不仅已经成为危害环境,影响人类健康的 铬的作用,比如Escherichiacoli(大肠杆菌) 、Brucella 元凶之一,同时也严重损伤农作物机体。铬污染的来 [4] [5] sp.(布鲁氏杆菌) 、Providenciasp. 等等。本研究将 源主要来自金属加工、制革业以及电镀行业,国家环保 筛选出的C2还原菌为研究对象,研究其对六价铬的还 部的资料显示,目前,我国受铬等重金属污染的耕地面 原情况。 积近2000万公顷,约占耕地总面积的1/5。全国每年 1 材料与方法 因重金属污染而减产粮食一千多万吨。铬虽然是人和 动物所必需的微量元素,但是过量的铬有致癌作用,尤 1.1 菌 种 [1]   本研究所选用的C2菌株是本实验室从活性污泥 其是六价铬是一种危害极大的致癌物质 ,如今铬渣 已成为铬污染的重要环境问题,2011年的云南省曲靖 经过不断筛选而来的。通过生理生化试验和16srDNA 铬污染事件轰动全国,由于铬渣随意堆放在水边、湖 分子生物学鉴定,确定所筛选的C2菌株为苏云金芽孢 边,造成了水体的严重污染,在其周边竟然形成了一个 杆菌(BacillusthuringiensisC2)。 6+ “癌症村”,村中的很多村民都被癌症所困扰,由此看出 1.2 Cr 浓度对C2细菌生长的影响 铬污染对人健康的严重危害,治理铬污染迫在眉睫。   将LB液体培养基(pH7.2)分装100ml到250ml的 处理铬污染的方法通常有物理法、化学法以及生 LB中,将无菌的重铬酸钾母液加入 LB中,在 37℃、 [2] 6+ 物法 。中国作为世界上铬盐生产最多的国家,处理 150r/min培养条件下,测定 C2菌在不同浓度的Cr 铬渣的方法主要有有水泥矿化剂、炼铁烧结、转窑干法 下的生长量。

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