酶解法制备植物叶绿体DNAcpDNATheEnzyme-lysedMethodfor.PDFVIP

  分子植物育种(网络版), 2011 年, 第9 卷, 第1843-1846 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2011, Vol.9, 1843-1846 http://mpb.   技术改进 Upgraded Technology 酶解法制备植物叶绿体DNA(cpDNA) 张双玲 , 何道一 淮北师范大学生命科学学院, 资源植物生物学安徽省重点实验室, 淮北, 235000 通讯作者: daoyi1h@; 作者 分子植物育种, 2011 年, 第 9 卷, 第 115 篇 doi: 10.5376/.2011.09.0115 收稿日期：2011 年 09 月 19 日 接受日期：2011 年 09 月 30 日 发表日期：2011 年 11 月 07 日 这是一篇采用 Creative Commons Attribution License 进行授权的开放取阅论文。只要对本原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条 件的使用与传播。 引用格式( 中文) ： 张双玲等, 2011, 酶解法制备植物叶绿体 DNA(cpDNA), 分子植物育种(online) Vol.9 No.115 pp.1843-1846 (doi: 10.5376/mpb. cn.2011.09.0115) 引用格式(英文) ： Zhang et al., 2011, The enzyme-lysed method for preparation of plant cpDNA (chloroplast DNA), Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol.9 No.115 pp.1843-1846 (doi: 10.5376/.2011.09.0115) 摘 要 植物叶绿体 DNA 制备相对较为困难，与核基因组 DNA 相比，其产量很低。为提高植物 cpDNA 制备效率，本法采 用酶解液预处理植物叶片。研磨前以含有 1%的纤维素酶和0.5% 的果胶酶的去壁酶液处理植物叶片2 h ，有效提高完整叶绿 体和 cpDNA 的产量，以此方法制备 1 g 新鲜的烟草叶片的 cpDNA 的量要高于传统方法制备4 g 材料的。用 Sam Ⅰ酶切制备 的烟草的cpDNA，结果表明所制备的 cpDNA 质量好，能满足实验需要。以小麦和大豆叶片实验材料，采用该方法也能制备 出高质量的cpDNA，表明该方法适于多数植物 cpDNA 的制备，对进一步研究植物cpDNA 基因组结构、叶绿体遗传转化等 方面有积极意义。 关键词 酶解法; 叶绿体DNA; 烟草 The Enzyme-lysed Method for Preparation of Plant cpDNA (chloroplast DNA) Zhang Shuangling , He Daoyi School of Life Sciences, Huaibei Normal University, Anhui Key Laboratory of Resources and Plant Biology, Huaibei, 235000, P.R., China Corresponding author, daoyi1h@; Authors Abstract It is relatively difficult to prepare plant chloroplast DNA. Quantity of cpDNA is much less than genomic DNA in plants. In order to increase efficiency of cpDNA preparation, the plant leaves were pre-treated by lyses solution buffer before cpDNA isolat