第15章 基因信息的传递.pdfVIP

 一、DNA的半保留复制 （一）半保留复制的理论 半保留复制 （semiconservative replication ）方式，是 Watson和Crick 根据DNADNA双螺旋模型提出来的，即在 子代的DNA 中，一条链来自亲代，另 一条链是新合成的。 （二）参与DNA复制的酶 主要有DNA聚合酶和DNA链接酶。 1. DNA聚合反应 在DNA聚合酶催化下，脱氧 核糖核苷酸被加到已有的核酸链的 游离3 ′-OH上，同时释放出无机焦 磷酸。 2. 大肠杆菌DNA聚合酶 大肠杆菌中有五种不同的DNA聚合酶，它们分别称为DNA 聚合酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。 3. 真核生物DNA聚合酶 真核生物钟存在5种DNA聚合酶，他们分别以α、β、γ、δ、 ξ命名。 哺乳动物的哺乳动物的DNADNA聚合酶聚合酶 4. DNA连接酶 催化双链DNA粘性末端切口处的5′-磷酸基和3′-羟基生成 磷酸二酯键。细菌的DNA连接酶以NAD为能源，动物细胞 和噬菌体的连接酶以ATP为能源。T 的DNA连接酶可以连接 4 平末端。 （三）复制的起始点和方式 1. 复制的起始 复制是在起始阶段进行控制的。DNA一旦复制开始，它即继 续下去，直到整个复制子完成复制。大肠杆菌的复制起点称 为ori C，由245个bp构成，其序列和控制元件在细菌复制起 点中十分保守。关键序列存在两组短的重复 ：三个13bp的序 列和四个9bp序列。 3 ×13bp 直接重复序列 Dna 结合位点，4 ×9bp 保守序列： 保守序列： GATCTNTTNTTTT TTATCCACA 2. 复制方式 DNA复制时，从复制起点开始，两条链解开，已解开的两 链与未解链的双链间形成一个叉子的结构称为复制叉复制叉。 双向复制：即 形成两个复制 叉或生长点。 单向复制：只 形成一个复制形成一个复制 叉或生长点。 （四）复制过程 1. 模板DNA的解链和解旋 2. 半不连续复制 1968年，冈崎等人发现，以复制叉向前移动的方向为标准，3′→5′ 走向的一条模板链，在其上DNA新链能以5′→3′连续合成，称先先 导链导链；另一条链5′→3′走向的模板链在其上新链的合成也是5′→3′， 但是与复制叉移动方向相反，且合成出许多不连续的片段，称为 冈崎片段，最后合成一条完整的链，称为后随链后随链。 3. 引物合成 目前已知的DNA聚合酶都只能从引物的3′-OH末端延伸DNA链， 而不能从头合成。复制的引物是由引发酶合成的RNA片段， 长度为几个到十几个核苷酸。 4. 合成的终止 DNA聚合酶 Ⅰ以其5 ′→3′外切酶活力将RNA引物切除，引物 切除后切除后，，引物切除留下的空缺也由引物切除留下的空缺也由DNADNA聚合酶聚合酶 ⅠⅠ从下一个冈从下一个冈 崎片段3′-OH端开始，按模板要求延伸DNA链，将缺口补齐， 再由DNA连接酶将相邻冈崎片段连接起来，形成完整的新链。  二、依赖RNA的DNA的合成 逆转录 ：以RNA为模板合成DNA，称为逆转录逆转录。 （一）反转录酶的性质 反转录酶催化DNA合成反应要求有模板和引物，模板和 引物可以是RNA，也可以是DNA。以4种脱氧核苷三磷酸作 为底物，此外还需要2价阳离子 （Mg2+和Mn2+ ），DNA链 的延长方向为5 ′→3′，这些性质都与DNA聚合酶相似。 （二）反转录过程  三、DNA损伤 （突变）修复 （一）引起DNA损伤的因素 1. 物理因