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第四章-第二讲-沉淀

发酵液 预处理 细胞分离 ( 细胞破碎 胞 外 酶 细胞碎片分离 ) 初步分离 纯化 成品加工 纯化方法选择的总体原则 1、判断采用的方法和条件是否得当,始终以检测 指标为参考标准; 2、应对被纯化的酶的理化性质有一个比较全面的 了解; 3、在纯化工作中,往往不宜重复采用相同的步骤 和条件; 4、要严格控制操作条件。 发酵液的预处理 目的:改变发酵液的物理性质,降低粘度,便于 固液分离。 方法: (1 )加热:适用于耐热的酶,加适当酶保护剂 (2 )加凝聚剂或絮凝剂 (3 )调pH值 细胞破碎方法及其原理 捣碎法 机械破碎 通过机械运动产生的剪切 研磨法 力,使组织、细胞破碎。 匀浆法 通过各种物理因素的作用, 温度差破碎法 物理破碎 使组织、细胞的外层结构破 压力差破碎法 坏,而使细胞破碎。 超声波破碎法 化学破碎 通过各种化学试剂对细胞 有机溶剂 膜的作用,而使细胞破碎 表面活性剂 通过细胞本身的酶系或外 酶促破碎 加酶制剂的催化作用,使 自溶法 细胞外层结构受到破坏 外加酶法 发酵液 提取法 发酵法 预处理 含酶原料 细胞分离 ( 酶的抽提 细胞破碎 胞

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