面膜类化妆品中氟轻松检测方法(高效液相色谱-串联质谱法)探究.docx

附件面膜类化妆品中氟轻松检测方法（高效液相色谱-串联质谱法）1范围本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。2方法提要面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。本方法的检出限为0.03 μg/g，定量限为0.05 μg/g。3试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。3.1甲醇：色谱纯。3.2乙腈：色谱纯。3.3冰醋酸：优级纯。3.4饱和氯化钠溶液。3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。4仪器和设备4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。4.3 涡旋混合器。4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。4.5 固相萃取装置。5分析步骤5.1样品处理5.1.1提取称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以5000 r/min离心10 min，吸出上层清液置于另一50 mL具塞离心管中，下层溶液用2 mL乙腈重复提取一次，合并两次乙腈提取液，向提取液中加入40 mL纯化水，混匀，加入10%亚铁氰化钾溶液（3.5）0.2 mL，混匀，加入20%乙酸锌溶液（3.6）0.2 mL，混匀，以5000 r/min离心10 min，取全部上清液待进行净化处理。5.1.2净化将Oasis HLB固相萃取小柱（3.7）接上固相萃取装置，小柱预先依次用甲醇5 mL、水10 mL进行活化。将待净化的样品上清液（5.1.1）倒入漏斗，经滤纸滤过后，滤液流经小柱，待样品溶液自然流尽后，用10%乙腈水溶液10mL清洗小柱，待清洗液自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液。在柱出口处接一10mL具塞离心管，用甲醇4 mL淋洗小柱，待甲醇自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液。取下离心管，将接收的甲醇用氮气吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后测定（或根据需要的浓度用50%的甲醇水溶液重新溶解定容后测定）。5.2基质标准曲线溶液制备称取空白样品5份（带有载体的面膜，去除载体后取样），每份0.2g，精确到0.0001g，置15mL具塞离心管中，分别精密加入各浓度的标准工作溶液（3.10）0.2mL，按样品处理（5.2）步骤操作，将接收的甲醇用氮气吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后测定。5.3 色谱-质谱参考条件5.3.1高效液相色谱参考分析条件色谱柱：SB C18，50 mm×2.1 mm（内径），1.8μm，或相当者；柱温：室温；高效液相色谱流动相及参考分离条件见表1；进样量：5μL。表1高效液相色谱流动相及参考分离条件时间/ min流速/ (mL/min)流动相A（水，含0.1%醋酸）流动相B（乙腈，含0.1%醋酸）00.368%32%30.368%32%120.325%75%140.325%75%14.10.368%32%160.368%32%5.3.2质谱检测参考条件电离方式：电喷雾电离，ESI（+）离子喷雾电压：4 kV；雾化气：氮气，38Psi；干燥气：氮气，流速：12L/min，温度：350 ℃；碰撞气：氩气；检测方式：多反应监测（MRM）。氟轻松的质谱测定参考参数见表2。表2氟轻松的质谱测定参考参数药物名称出峰时间相对分子质量母离子（锥孔电压）子离子（碰撞能量）*氟轻松3.84 min452.4882453.3（117 V）337.2（13 eV）1