分子生物学次课.ppt

线性DNA复制子末端复制 1.转变为环状或多聚分子 2.在DNA末端形成发夹式结构 3.在某种蛋白的介入下，在真正的末端复制 4.真核生物线性染色体由端粒酶负责新合成链5?端RNA引物切除后的填补 端粒结构 1.错配修复 错配修复 　6.SOS修复 为DNA的损伤所诱导，而产生缺乏校对功能的DNA聚合酶，它能在DNA损伤部位进行复制而避免了死亡，可是却带来了高的突变率（所以会有2种结果：修复或变异（进化） ，这属于倾向差错的修复。 六、转 座 基因组是相对稳定的，基因组中的序列通常处于恒定的位置。因此，我们可以通过构建遗传图谱(genetic map)来鉴定已知基因的基因座。 在分子水平上，每个个体基因组之间的差异主要由重组引起，但转座元件（transposable element）或转座子（transposons）的存在也可以造成基因组的改变。 1.转座子的概念及发现 转座子 (transposon 或 transposable element)是基因组内相对独立的、可移动序列，它们不必借用噬菌体或质粒的形式就可以从基因组的一个部位直接转移到另一个部位，这个过程称为转座（transposition） 转座子每次移动时携带着转座必需的基因一起在基因组内跃迁，所以转座子又称跳跃基因（jumping gene） 转座元件首先是由Barbara McClintock于40年代在玉米的遗传学研究中发现的，她称之为控制元件（controlling element），因为它不仅能够在基因组内转移，而且还能够改变基因的活性并引起功能的改变。 现在认为转座子存在于地球上所有的生物。 2 特点： ? 转座子是基因组的正常组成成分，不以独立的形式存在（如噬菌体或质粒DNA）。 ? 不必借助同源序列就可移动的DNA片段，即转座作 用与供体和受体之间的序列无关。 ? 原核生物和真核生物均有转座子。 ? 转座序列可沿染色体移动，甚至在不同染色体间跳 跃。 ?转座以很低的频率发生，而且转座子的插入是随机的， 每种IS元件具有不同序列，但有共同的组织形式 B 复合转座子 ? 表示法：通常以Tn和后面加上数码表示， 如Tn903。 ? 结构: a. 除有转座酶基因外还有其它表型基因， 如：抗药基因，使宿主具表性效应。b. 两侧有重复序列。c. 有的转座子的重复顺序就是IS。 ? 功能：和 IS 一样可以从一个位点转座到另一个位点。 4. 转座发生的机制 转座子插入到一个新的部位的通常步骤是：在靶DNA上制造一个交错的切口，然后转座子与突出的单链末端相连接，并填充切口。 交错末端的产生和填充解释了在插入部位产生靶DNA正向重复的原因。链的切口之间的交错决定了正向重复的长度。 复制型转座 转座元件作为一个物理实体直接由一个部位转移到另一个部位。 除了引起在新部位序列插入的简单分子间转座之外，转座子还能促进其他类型的DNA重排。 任何一对正向重复序列之间的重组会导致它们的序列的缺失；而一对反向重复序列之间的交互重组可能使重复序列之间的序列被倒位，而重复序列本身被保留。 反转录转座子(retrotransposon或retroposon) 指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。这样的转座过程称为反转座作用(retrotrans—position)。 3 种类与特征 （1） 两种类型： A 简单转座子（simple transposon） 或（插入序列 insertion sequence IS ） B 复合转座子（composite transposon） （2） 特征： a）两端有20～40bp的反向重复序列(IR) b）具有编码转座酶（transposase）的基因 c）复合转座子除转座酶基因外还有1—数个基因。 d）转座酶催化转座子插入新位点。 A 插入序列 ? 最简单，是细菌染色体、质粒和某些噬菌体的正常组分，是一个自主的单位，每种IS均编码自身转座所需的蛋白质。 ? 命名： IS＋编号（鉴定类型） 长度 700～2000bp 插入序列IS1的结构 Tn1681 大肠杆菌热稳定毒素I 基因 552 bp IR IR IR IR 复合转座子结构示意图 IS1 IS1 a) TnA family l 具有IR、转座酶基因、 调节基因（解离酶）、 抗抗生素基因 2.5 kb