生化实验斐林试剂比色法测还原糖含量.pptVIP

实验03 植物组织中还原糖含量的测定 （斐林试剂比色法） 材料：新鲜植物叶片 仪器设备：分光光度计、分析天平、低速离心机、水浴锅等 试剂：1. 斐林试剂A液：40g CuSO4·5H2O溶解于蒸馏水定容至1.0L。2. 斐林试剂B液：200g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6·5H2O）与150g NaOH溶于蒸馏水中，并定容至1.0L。 A、B两液分别贮存，使用前按1：1体积混合。 （已配好） 三、实验方法与步骤 比色测定：用H2O作调0空白参比液！在590nm波长下测定各管的吸光度。 标准曲线绘制： 以葡萄糖量(mg)为横座标，吸光度差值(ΔA590 ）为纵座标，在座标纸上绘制出标准曲线。 2 样品还原糖提取与测定 3.0～4.0g样品 —→加水研磨成匀浆后转入50ml大试管 —→80℃水浴20min（间歇震荡） —→冷却后转入100ml容量瓶定容、过滤后得到待测溶液。 取待测液6.0ml进行测定（按制作标准曲线的步骤）。 样品还原糖的含量（%）＝ 注意事项与思考： 2种温度水浴处理，不可弄混 离心机使用注意安全。 思考：比较双缩脲试剂与斐林试剂的差异？ 思考：比较本实验与蛋白质测定实验中的化学原理差异？ * * Designed by X