生物样品.ppt

药物在生物样品内作用机理的研究 国内对中药复方代谢化学的研究基本是 空白，而国外对此研究较多，如Yoshihiro等 阐述植物制剂的药理学特性而作的有关系列 研究 在直接进行体内代谢有一定困难的情况 下，可先进行体外代谢研究，确定代谢物结 构，再根据其理化性质，建立较专一、灵敏 的分析方法，以考察体内代谢情况，了解药 物在体内的代谢方式 粪便温孵法和离体消化道内容物温孵法 是研究药物在消化道内的代谢 动物肝微粒体体外代谢方法用来研究药 物在肝脏的代谢，制备成肝微粒体悬浮液后， 加入药物和合适的培养液，检查代谢物及含量 许多中药成分是在消化道细菌丛作用下代谢的，特别是肠道内细菌的苷键水解酶系对具有苷键的药物水解是肠道内细菌代谢药物的一大特征 体外代谢实验可迅速地解决一些复杂的 药物代谢研究中的问题，可以比较方便地控 制某些代谢条件，如肠道菌种等，代谢体系 较纯净，易于对代谢物进行分离、提取，可 在较短的时间内得到明确结果，尤其在中药 代谢研究中具有突出的优越性 或用GC／MS对样品处理液进行分析， 推测代谢物结构，并结合衍生物的GC／MS 分析，进一步确定结构 药物代谢转化成代谢物后，一般是水溶 性增大，在HPLC分析过程中，代谢物峰保 留时间在原型药峰之前，用原药色谱峰作为 分析过程结束的指标，易于判断。由于药物 代谢转化多数是对母体结构的修饰，未改变 原核的骨架，不影响药物分子的整个光谱波 形。 药物经代谢转化后，产生的药理作用 是原药所为还是代谢物抑或是它们的共同 作用，必须做原药、代谢物的药理作用比 较研究，才能得出正确的结论。 这对阐述药物代谢失活或代谢活化， 为研制新药提供依据有直接的指导意义。 给药途径不同，药物代谢转化的结果及 其药代动力学性质可能不同。 中药代谢化学的研究，应注意结合给药 形式，采取适当给药途径研究中药的代谢， 才能得出正确的结论 酚类：天麻素（gastrodin）和天麻苷元（gastrodiggenin）是中药天麻的主要有效成分，具有镇静、抗惊等作用。 对小鼠静注给药后的组织提取液分析表明，天麻素可以透过血脑屏障进入脑内，并在脑、血、肝中迅速分解为天麻苷元，然后以天麻苷元的形式存留在脑组织内，发挥中枢镇静作用。 天麻苷元和天麻素都主要经肾排泄，天麻素在小鼠体内可能存在肠肝循环。 第四节 生物样品内药物分析方法 建立可靠的方法是生物样品内药物分析研究的重要主题。 方法评价 1.准确度 2.精密度 3.灵敏度：检测限、定量限、最低检测浓度 4.方法的专属性 5.线性范围 6.稳定性 A 人体 B 动物体 C 两者均可 D 两者均无 A 原型药物总量 B 游离药物 C 代谢物 D 结合药物 E 綴合物 A 母体药物 B 代谢产物 C 两者均可 D 两者均不可 一、常用生物样品 （一）生物样品的种类、特点与采集 1. 血样－－测定血药浓度 第三节 生物样品的制备 * 测定药物原型总量 * 当药物与蛋白结合率稳定， 血药总浓度表示游离药物的浓度 血 浆 血 清 全 血 血清 血液凝结后经离心的上清液 血浆 血液加抗凝剂后经离心的上清液 （无纤维蛋白原） 采样后应立即离心，与全血分离，冷藏 *冰冻会引起细胞溶解，阻碍分离 *血浆中药物浓度反应药物在体内的状况 （肝素） （有纤维蛋白原） 全血 加抗凝剂 * 红细胞药浓与血浆大多成正比 * 全血净化步骤较繁 * 溶血后的血色素对测定有干扰 血样的主要成分区别 有 无 无 血细胞 有 有 无 纤维蛋白原 全血 血浆 血清 血样 成分 （二）尿液 *体内药物清除的主要通道，适 于药物代谢的分析 *尿中药物浓度较高，但与血药 浓度相关性差 药物原型、缀合物、代谢物 *不能随时、定时采样 肾小球滤过 肾小管重吸收 *采样后冰箱保存（4℃） *室温放置须加防腐剂（甲苯、氯仿） *长时间放置须冷冻保存 尿样 营养丰富 （三）唾液 *与血药浓度成正比 *无创性采样 *采样简便，不受设备、时间、 地点限制 *【唾液药物】【血浆药物】 （存在恒定的比例关系） 【唾液药物】变化【血浆药物】变化 （四）各种脏器组织 研究药物在各器官、组织的分布、积蓄或代谢产物情况 * -20℃速冻 * 制成匀浆后分离分析 二、样品预处理 （一）药物的提取 （1）加入中性盐 使蛋白质脱水而↓ 例 硫酸铵、硫