微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响.pdfVIP

第２３卷第２期 烟台大学学报（自然科学与工程版） Ｖｏｌ．２３Ｎｏ．２ ２０１０年４月 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹａｎｔａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＥｄｉｔｉｏｎ） Ａｐｒ．２０１０ 　　文章编号２０１０ 微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响 １ １，２ 左　明 ，王长海 （１．大连理工大学 生命科学与工程系，辽宁 大连 １１６０２４；２．烟台大学 海洋学院，山东 烟台２６４００５） 摘　要：研究了锌、钼、钴、铜、锰、铁６种微量元素对转植酸酶基因小球藻生长的影响．通 过单因子实验确定了此６种微量元素促进转基因小球藻生长及胞内植酸酶表达的浓度范 围，通过正交实验确定了锌、钼、钴、铜、锰促进转植酸酶基因小球藻生长的最佳浓度，获转 植酸酶基因小球藻最大生物量产量的浓度依次为０１０、００１５、００１、００１５、０８ ｍｏｌ／Ｌ； μ 获转植酸酶基因小球藻最高植酸酶比活值的浓度依次为０１０、０、００４、００１５、０４ ｍｏｌ／ μ Ｌ．利用微量元素优化配方培养转植酸酶基因小球藻，可使胞内植酸酶比活值显著提高， 但微藻生物量产量有所下降． 关键词：微藻；转基因小球藻；植酸酶；微量元素；生长 中图分类号：Ｑ９４９．２　　　　文献标识码：Ａ 　　小球藻为绿藻门（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｔａ）小球藻属 植酸酶基因小球藻生长的影响，寻求转植酸酶基 （Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）的一种单细胞绿藻，其细胞结构相对 因小球藻生长及胞内植酸酶表达的最佳微量元素 简单且富含营养［１－２］，并可生产一些需要翻译后 浓度，以期为转植酸酶基因小球藻的大规模培养 修饰的复杂蛋白［３－４］．植酸酶能将植酸降解为肌 奠定基础． 醇和无机磷酸，作为饲料添加剂，可提高植物饲料 中磷的利用率，减少动物粪便中磷排泄量，还具有 １　材料与方法 降低植酸的抗营养作用［５－６］；如果将转植酸酶基 １．１　实验材料 因小球藻直接作为饲料添加剂，不仅可以省去了 小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａｓｐ．ＭＡＣＣ／Ｃ９５）购自中国 复杂的植酸酶提纯分离工艺，而且在补充植酸酶 海洋大学，并经本实验室分离纯化除菌；转基因小 同时，还能为动物提供一定的营养成分，可谓一举 ［６］ 球藻：本实验室获得 ． 两得，具有很好的开发前景． 硫酸锌 （ＺｎＳＯ ·４ＨＯ）、氯化锰 （ＭｎＣｌ· 关于大量元素对小球藻生长的影响，前人已 ４ ２ ２ ［７－８］ ４ＨＯ）、硫 酸 铜 （ＣｕＳＯ ·５ＨＯ）、钼 酸 钠 有较多报道 ，而微量元素在海水单胞藻的生 ２ ４ ２ （ＮａＭｏＯ ·２ＨＯ）、氯化钴（ＣｏＣｌ·２ＨＯ）、乙二 长过程中也是不可缺少的．由于有些微量元素是