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G试验良百床推广课件
北京金山川科技发展有限公司 天津市一瑞生物工程有限公司 侵袭性真菌感染(IFI)的定义 侵袭性真菌感染的特点 侵袭性真菌感染(IFI)现状 国内深部真菌感染不容忽视 侵袭性真菌感染(IFI)现状 美国四大医疗中心做的关于IFI的一项回顾性研究 侵袭性真菌感染(IFI)现状 G 试 验 1-3-β-D-葡聚糖可特异性激活鲎(Limulus)变形细胞裂解物中的G因子,引起裂解物凝固,故称G试验。 1-3-β-D-葡聚糖本质及特点 (1-3)-β-D-葡聚糖特性 G试验检测的特点 可检测多种致病真菌感染: 念珠菌,曲霉,肺孢子菌,镰刀菌,地霉, 毛孢子菌等 侵袭性真菌感染的诊断标准EORTC/MSG2008修订版 宿主因素 临床特征 病原学 真菌镜检 真菌培养 组织病理学检查 血清学检查方法(间接证据) G-test——临床诊断 微生物学标准 : (1)痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌 (2)鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查,或培养呈霉菌阳性; (3)痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌; (4)支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品呈曲霉菌抗原(半乳甘露聚糖检测、GM试验)阳性; (5)血液中(1,3)-β-D葡聚糖检测(G试验)阳性; (6)血中隐球菌抗原阳性; (7)无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌; (8)未留置尿管的情况下,连续2份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型; (9)血培养呈酵母菌阳性; (10)肺部异常,与下呼吸道感染相关的标本中(血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等)多次培养无任何致病细菌。 实验室检查指导临床诊断与治疗 定义 细菌内毒素( Endotoxin )是G-菌细胞壁上的特有结构,为外源性致热原,它可激活中性粒细胞等,使之释放出一种内源性热原质,作用于体温调节中枢引起发热。内毒素的主要化学成分为脂多糖(LPS)中的类脂A。 体内内毒素的来源 实验原理: 检测物质:脂多糖(内毒素主要成分) 脂多糖可特异性激活鲎(Limulus)变形细胞裂解物中的C因子,再激活B因子,经过一系列反应,最终引起裂解物凝固的过程。 实验原理图: 传统热原检测方法与MB-80方法比较 内毒素检测的临床应用 MB-80系统 1.系统组成: 1)仪器 MB-80主机 (MB-80(E)、MB-80(D)、MB-80(S)、MB-80(V)、MB-80(M)) 2)MB-80软件系统 3)试剂 (配套真菌、内毒素试剂盒) 4)配套无热原耗材 2.系统功能: 快速定量检测深部真菌和内毒素,帮助临床医生早期诊断目前常规方法难以确诊的侵袭性真菌感染、革兰氏阴性菌感染,便于临床医生的早期诊断、早期治疗及对治疗的疗效进行判定。 3.可检测标本 : 血液、尿液、脑脊液、胸腔积液、腹水等。 血液透析液,透析用水--(内毒素检测) MB-80优势 快速 ---1个小时完成检测 动态 ---动态检测 定量 ---定量检测 灵敏 ---真菌(1-3)-β-D葡聚糖最低检测量5pg/ml 内毒素最低检测量1pg/ml 适合服务临床科室 呼吸科 血液科 肿瘤科 烧伤科 感染科 ICU病房 器官移植部门等 仪器检测原理 动态比浊法: 动态定量检测真菌可溶性抗原(1-3)-β-D葡聚糖,革兰阴性菌可溶性抗原(脂多糖),系统通过测定生物试剂与检测样品中抗原抗体反应生成浊度,采用动态比浊法,连续检测浊度的变化,建立时间(T)与微生物含量(C)关系的标准曲线,通过光电转换原理,经软件系统分析得出具体检测值,得出检测样品中含真菌或内毒素含量。 临床阈值 MB-80系统定量测定(1-3)-β-D-葡聚糖的临床意义 临床评价 例1---- 徐英春 北京协和医院 检验科 肝炎,右肺实变,右胸腔积液 支气管镜做细菌,TB、真菌,血培养结果均阴性 8-19: ICU: 经验治疗:拜复乐+万古霉素 8-20 痰涂片:在中性粒细胞内可见革兰阳性球菌少量 PCT: 7.9ng/ml 治疗:特治星+万古霉素 8-26 T:38°C,不能脱呼吸机 WBC: 15.0x10^9/L 8-27:会诊 COPD? 非典病原体? PCP? 真菌? 抗菌药物?检查:G试验 G试验(pg/ml)变化情况 体温的变化情况 WBC(×109/L)的变化情况 总 结 分析前:无热原采血管、清洁的检测环境 连续>2次G试验阳性,可提高敏感性和PPV 临床可能出现假阳性情况,请结合其它检测结果和临床情况进行分析 动态监测:反映感染、疗效、有助于分析假阳性
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