同工酶SOD综合试验.docxVIP

大蒜超氧化物歧化酶（SOD）性质研究.--------------------综合实验姓名：学号：班级：学院：同组成员：指导老师：时间：[1]目录封面----------------------------------------------------1目录----------------------------------------------------2摘要----------------------------------------------------3关键词-------------------------------------------------3绪论----------------------------------------------------3实验材料：试剂-----------------------------------------------4仪器设备-----------------------------------------5实验内容：酶液提取-----------------------------------------5酶的性质-----------------------------------------6同工酶类型判断（电泳）-------------------7酶活力的测定-----------------------------------9结果与讨论：结果分析----------------------------------------10实验过程以及结果的讨论和注意事项----------------------------------------------------------11参考文献---------------------------------------------12[2]摘要：SOD广泛存在生物界，是防御氧毒害的关键酶。SOD主要有CuZn-,Mn-,Fe-SOD三种类型的同工酶，它们的共同的生物学作用是专一的清除氧化中产生的超氧阴离子自由基（对细胞组分及细胞器，尤其是生物膜有严重的损坏作用），具有抗衰老，抗辐射，抗癌等生理作用。在医药中，SOD可用于治疗辐射病，自身免疫性疾病，炎症等；在食品中，可用于保健食品添加剂；在化妆品中，可防止皮肤衰老，抗炎，防晒等作用。植物中大蒜的SOD含量丰富，所以，本实验研究大蒜中SOD的性质，并且确定SOD同工酶的类型。根据SOD的性质，我们采用邻苯三酚自氧化法判断同工酶的最适温度，最适PH，以及双氧水对酶的活力抑制。并采用改进的自氧化法测酶的活力.二．关键词：SOD同工酶 最适温度 最适PH 抑制剂邻苯三酚自氧化 NBT光化还原分光光度计三．绪论① SOD广泛存在生物界，是防御氧毒害的关键酶。具有抗衰老，抗辐射，抗癌等生理作用。在医药中，SOD可用于治疗辐射病，自身免疫性疾病，炎症等；在食品中，可用于保健食品添加剂；在化妆品中，可防止皮肤衰老，抗炎，防晒等作用。②本实验研究大蒜中SOD的性质，并且确定SOD同工酶的类型。 [3]③通过本实验，掌握不连续凝胶电泳的基本操作技能，同时养成认真，严谨的实验态度。四．实验材料①试剂：1．2.45mol/LNBT溶液：称取200mgNBT溶于蒸馏水中并定容至100ml置棕色试剂瓶中，避光4贮存。2. 3.60mol/L PH7.8磷酸缓冲液（内含2.8mol/L TEMED和2.8 维生素）：在100ml 3.60mol/L PH7.8 磷酸钠缓冲液中加0.42mlTEMED及1.32mg维生素 ，置棕色瓶中4贮存。3．PH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液：称取Tris6.0g,甘氨酸28.8g，加水至1000ml,用是加水稀释10倍。4. PH8.9 1.5mol/L Tris-HCl 缓冲液：称取18.2g三羟甲基氨基甲烷（Tris）加24ml 1mol/L盐酸，加水至100ml.5. PH6.8 0.5mol/L Tris-HCl 缓冲液:称取Tris6.0g,加48ml 1.0mol/L 盐酸溶液100ml 。6.以及不同浓度的磷酸缓冲液。7. 凝胶贮液以及凝胶 A液：48ml 1mol/L Hcl,36g Tris,0.24ml TEMED. B液：48ml 1mol/L Hcl,5.9g Tris,0.46ml TEMED。 C液：30g Acr,0.8gBis [4]D液：