过氧化物酶染色法.docVIP

项目名称： 碱性磷酸酶染色法 检验标本： 外周血涂片 收费标准： 50元 检验方法：细胞化学染色 原 理：在PH9.5时，底物被白细胞的酶水解，释出磷 酸根和芳香萘胺，后者与偶氮盐偶合，形成有 色沉淀。 试 剂：1.固定液（保存于4℃）冰箱 2. 0.05缓冲液（PH9.4~9.6）保存于4℃冰箱 3.底物 4.二甲基甲酰胺 5.固紫B 操作步骤：1.血片或髓片放置4C固定液中30秒，流水冲 洗，空气晾干 2.工作液：（1）用二甲基甲酰胺溶解底物后， 倒入缓冲液中 （2）再加入固紫B混匀 3.把固定后的玻璃片放入工作液中，置37C水 温箱45分钟 4.流水冲洗 5.苏木精复染 6.流水洗，晾干 7.直接油镜观片 结 果：酶活动处呈亮红颗粒 正常参考值：积分10～100分/100个中性分叶核细胞 意 义：NAP活性增高见于细菌性感染、类白反应、再 障、某些肿瘤、急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病急性变等。 NAP活性减低见于慢性粒细胞白血病、急性粒细胞白血病、绿色瘤、红白血病、PNH、病毒感染等。 注意事项：1.外周血涂片标本需新鲜，收到标本后需立即 用专用固定液固定。 2.试剂需防在4℃冰箱内，临用前拿出，试剂打开后需立即应用，最长不得超过30min。 项目名称：过氧化物酶染色法 检验标本：骨髓涂片 收费标准：50元 检验方法：细胞化学染色 检验原理：过氧化物酶在细胞内的颗粒从H2O2中释放出 氧，氧化联苯胺，引起在过氧化酶活性处，沉 积棕黑色的化合物。 试 剂：1.0.3%联苯胺酒精溶液 2.H2O2溶液（3%H2O2+蒸馏水5ml） 操作步骤：1.骨髓涂片加0.3%联苯胺酒精溶液10-15滴 2.一分钟后，加H2O2溶液10-15滴 3.五分钟后，流水冲洗 4.再用瑞氏染液复染 5.水洗，晒干 结 果：酶活力处呈棕黑色。 意 义：急性白血病中可借过氧化物酶染色区蓓别急淋 与急非淋。急淋POX呈阴性反应，FAB分型规定阳性率＜3%。急非淋呈阳性反应，阳性率≥3%。 注意事项：1.骨髓涂片标本需新鲜，收到标本后需立即染 色。 2. H2O2需新鲜配制，浓度要适中，过浓、过稀都不可。 项目名称： 酸性磷酸酶染色法 检验标本： 骨髓涂片 收费标准： 50元 检验方法：细胞化学染色 原 理：同硷性磷酸酶，区别在于底物不同。最重要的 是反应时PH值不同，因而捕获剂（偶氮盐）液不同 试 剂：1.固定液（保存于4℃冰箱） 2. 0.1M醋酸缓冲液PH5.0 3.底物 4.二甲基甲酰胺 5.盐酸副品红 6.亚硝酸钠 操作步骤：1.涂片置于4C固定液中30秒 2.混合等量亚硝酸钠与副品红溶液（六偶氮化 副品红）约一分钟后用 3.工作液：（1）用二甲基甲酰胺溶解底物后倒 入缓冲液中 （2）将六偶氮化副品红加入上述溶 液中 4.涂片放入工作液中，置37℃水温箱90分钟 5.流水洗，晾干 6.1%甲基绿复染 7.水稍洗 8.晾干 9.直接油镜晾干 结 果：酶活力处呈桔红色 意 义：毛细胞性白血病细胞呈阳性，并抗酒石酸 注意事项：1.骨髓涂片标本需新鲜，收到标本后需立即 用专用固定液固定。 2.试剂需防在4℃冰箱内，临用前拿出，试剂打开后需立即应用，最长不得超过30min。 项目名称：非特异性脂酶染色法 检验标本： 骨髓涂片 收费标准： 50元 检验方法：细胞化学染色 原 理：同硷性磷酸酶，仅底物用醋酸盐 试 剂：1.固定液 2.0.1M磷酸缓冲液PH6.8 3.底