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植物相关细菌群体感应信号分子的检测 * 1, 2 2 3 刘晓光 , 高克祥 , 高吉刚 1 江苏大学生命科学研究院 镇江（212013 ） 2 山东农业大学植保学院 泰安（271018 ） 3 山东农业大学化学与材料科学学院 泰安（271018) E-mail：xgliu66@ 摘 要：许多革蓝氏阴性细菌以种群密度依赖的方式调控基因的表达，这种称为群体感应的 调控机制主要基于细菌产生的可扩散的小分子信号物质—— 酰基高丝氨酸内酯 （AHLs ）。 通过组合使用灵敏度不同的系列报告菌株，基于琼脂平板的生物检测及反相 C18 薄层层析 （TLC ）分析，比较研究了3 株植物固氮内生菌Herbaspirillum spp.和2 株植物根际促生菌 Serratia plymuthica 产生AHLs 的模式。结果显示了植物细菌AHLs 的多样性。3 株固氮内生 菌 Herbaspirillum spp.和 S. plymuthica 菌株 IC1270 都与小麦根际生防细菌 Pseudomonas fluorescens 2-79 具有相似的模式， 产生OH-取代基的AHLs 。而2 个S. plymuthica 菌株， 从葡萄根际分离的 IC1270 和从油菜根际分离的菌株 HRO-C48 则产生完全不同类型的 AHLs 。 菌株IC1270 主要产生OH-取代基的 HHHL ，HOHL ， HRO-C48 却产生无取代基 的BHL , HHL 和优势种 O-取代基的 OHHL。由此说明不同属的植物细菌可能具有相似的 AHLs 模式；相反，即使生态位相似的同种植物根际细菌S. plymuthica 的不同菌株间，却可 能产生完全不同类型的AHLs ，似乎与亲缘关系无关。 关键词：Serratia plymuthica ；Herbaspirillum spp.; 群体感应系统；酰基高丝氨酸内酯 中图分类号：Q933 1. 引言 在革蓝氏阴性细菌中，有 3 个重要的基因表达的全局调控系统，即 GacA/GacS 双因子 信号转导系统（GacA/GacS two-component system ），胁迫和稳定期的 δ 因子RpoS ，以及细 胞种群密度依赖的 Quorum-sensing （QS ）系统。它们控制植物相关细菌的许多表型，如植 物生长促进能力、致病性、次生代谢物的产生、生物膜形成以及蛋白和酶的分泌等[1] 。酰基 高丝氨酸内脂 N-acyl homoserine lactones （AHLs/acyl-HSLs ）是许多革兰氏阴性细菌都产生 的群体感应信号分子，它作为自身诱导物（autoinducer ）在革蓝氏阴性细菌中介导以种群密 度依赖和生长发育阶段(指数生长后期和稳定期)依赖方式的基因表达调控。植物相关细菌的 QS 系统调控微生物种群之间以及与寄主植物之间的相互作用，包括共生、致病性、抗生素 及胞外酶的产生等特性，因此在农业、医学、环境保护等领域具有广阔的应用前景。而且 AHLs 在自然界中作为全局调控的信号分子，通常是在 GacA/GacS 两组分信号转导系统的控 制之下。许多研究已证实这 3 个全局调控系统之间存在着密切联系，交互作用（cross-talk ）。 尽管有些结果相互矛盾，依然可以推测这种调控的级联反应在细菌中可能是一个普遍的现象 [2, 3] 。 本文通过组合使用多种系列灵敏度不同的 AHLs 信号分子的报告菌株或质粒，以植物根 基金项目：本课题受国家自然科学基金（项目编号30670030 ）资助 -1-