2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教案 1.docVIP

2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 教案 一、教学目标 1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 二、教学重点和难点 1.教学重点 （1）动物细胞培养的过程及条件。 （2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 （3）单克隆抗体的制备和应用。 2.教学难点 （1） 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 （2） 单克隆抗体的制备过程。 三、教学过程 复习旧课，导入新课： 复习两种细胞工程常用的技术手段，引出动物细胞工程的其他技术。 三．动物细胞融合： 教师活动：启发学生回忆植物体细胞杂交过程，并引导学生大胆推测：动物细胞融合与植物体细胞杂交过程有何不同？动物细胞融合相当于植物体细胞杂交过程的哪一步？ 学生活动：分析、讨论并得出结论：动物细胞融合相当于植物体细胞杂交的原生质融合过程。 引导学生阅读资料后，师生共同总结： 动物细胞融合与植物体细胞杂交的原生质融合的基本原理相同，就边诱导融合的方法也基本类似，只是除物理法、化学法外，还用到生物方法——即灭活的仙台病毒。 1．理论基础：细胞的全能性； 2．原理：细胞膜的流动性； 3．诱导方法：物理法、化学法、生物法（灭活的仙台病毒） 课件展示动物细胞融合的过程。 教师活动： 1．动物细胞之间或动物与人细胞之间都可以进行融合，产生的融合细胞有多少种？ 2．动物细胞融合技术主要用途是什么？ 引导学生回忆：何谓抗体？其由何种细胞产生？主要分布在哪？ 创设问题情境： 1．长期以来，人们为了获得抗体，采用的方法是什么？ 2．能否用动物细胞融合的方法，使体内的效应B细胞产生成千上万的单一抗体呢？ 教师活动：如果能用体内的效应B细胞产生成千上万的单一抗体，那么，怎样才能制备呢？请设计相关的方案。 让学生设计和汇报制备单克隆抗体的方案，并根据提纲阅读课文： 1．为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合呢？ （参考：细胞同源性越近，融合的杂种细胞越易成活。） 2．骨髓瘤细胞是癌细胞吗？（参考：有无限增殖能力即失去凋亡机制和接触抑制等的细胞为肿瘤细胞；而具有转移能力的肿瘤细胞为癌细胞。） 3．整个制备过程为何要经过两次筛选？（参考：第一次筛选可得到多种杂交瘤细胞，第二次筛选才能得到单一杂交瘤细胞。） 4．杂交瘤细胞在小鼠腹腔内培养与体外培养有何区别？（参考：能不断产生抗体） 5．杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，会造成小鼠死亡吗？单克隆抗体能用于人体疾病治疗吗？ 在教师引导学生自学基础上，分析、讨论并总结归纳出知识要点。 四．单克隆抗体： 1．概念：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。 2．特点：化学性质单一，特异性强，灵敏度高。 3．单克隆抗体的制备：（展示课件） 4.单克隆抗体的应用： （1）诊断疾病：诊断病毒引起的疾病和用癌细胞抗原制备的单克隆抗体定位诊断。 （2）药物导向治疗：运用药物与单克隆抗体连接在一起制成“生物导弹” （3）分离和纯化抗原分子。 教学小结：应抓住三个一，即“一种诱导细胞融合的新方法——灭活的病毒；一种新细胞——杂交瘤细胞；一种优势——单克隆抗体的特异性强、灵敏度高的抗体）。 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） （1）获得杂交瘤细胞 ① 将抗原注入小鼠体内获得效应B细胞 ② 效应B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 ③ 用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 （2）动物细胞培养 ① 筛选能够产生所需抗体细胞群 ② 再生培养液或小鼠腹腔中培养 （3）提取单克隆抗体 ：从培养液或小鼠腹水中提取