- 1、本文档共13页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
负荷尿中维生素B2测定 ——荧光分析法 维生素B2(核黄素) 黄色粉末状结晶体,水溶液呈现黄绿色荧光。 酸性及中性环境中对热稳定,碱性环境中易被热和紫外线破坏 代谢活性形式:黄素单核苷酸(FMN), 黄素腺嘌呤二核苷酸辅酶(FAD) 生理功能: 1、 参与体内生物氧化与能量代谢 2 、参与维生素B6和烟酸的代谢 3、其他生化反应,药物代谢等。 * 维生素B2缺乏与过量 维生素B2缺乏: 口腔:口角炎,唇炎,舌炎,地图舌 皮肤:脂溢性皮炎 眼:对光有过度敏感的反应、视物模糊等 其他影响:干扰体内铁的吸收、贮存及动员 影响生长发育 一般核黄素不会引起过量中毒。 * 食物中维生素B2来源 * 实验目的 应用尿负荷试验评价人体维生素B2营养状况。 * 实验原理 代谢角度: --水溶性维生素,在机体内存留时间短,满足机体需求后,多余部分迅速从尿中排出。 --当日常摄入量达不到机体需要量时,摄入的维生素制剂将首先留在体内满足机体需要,从而尿中排出量较少,反之亦然。 因此,可由尿中排出的维生素量来判断体内水溶性维生素的水平。 * 方法角度 --荧光化合物,在一定波长的光波照射下发黄绿色荧光。 --荧光强度F与溶液浓度C成线性关系—— F=KC * 仪器与试剂 荧光光度计 酸性水:取浓硫酸0.3ml,加蒸馏水稀释至200ml; 核黄素储备液(已配好):50μg/ml。酸性水配制,棕色瓶低温保存 核黄素标准应用液:1μg/ml。吸取核黄素储备液2ml,用酸性水稀释至100ml,棕色瓶低温保存,现用现配; 低亚硫酸钠(荧光熄灭剂) * 实验步骤 1 收集负荷尿 清晨排空小便后,空腹口服维生素B25mg,根据季节饮水200-500ml,收集服药后4h内所有尿液,并在瓶中加入1g左右草酸,使尿液保持在PH3-5,防止维生素B2降解,必要时还可加甲苯防腐。用量筒量取总尿液量并记录,做好标记后4℃短期保存,-20℃长期保存。 2 测定前读取尿液PH值,确保PH=3~5 3 负荷尿维生素B2测定 * 负荷尿维生素B2的测定 标准管 样品管 尿样(ml) 1 1 B2标准应用液(ml) 1.5 0 酸性水(ml) 7.5 9 混匀 荧光光度计读值(420、530nm) C A 低亚硫酸钠 1平匙 1平匙 混匀 背景荧光值(420、530nm) D B * 实验计算及结果 A-B 总尿量(ml) 尿中核黄素含量(μg)= [(C-D)-(A-B)] ×内标核黄素量(μg)× 分析用尿量(ml) F=KC ﹦〉C=F/K, K=F/C ﹦〉 K= [(C-D)-(A-B)]∕内标核黄素量 缺乏 (μg) 不足 (μg) 正常 (μg) 充裕 (μg) <400 400 ~ 799 800 ~ 1300 1300 * 注意事项 避光操作,酸性体系,迅速操作; 低亚硫酸钠不能加入过多,否则影响吸光值,加入后必需立即读数,否则维生素B2又会被空气氧化成荧光型; 拿比色皿侧棱,并保证比色皿四面清洁; 注意标准品的配制及保存; 作业提交: 公共卫生学 院620办公室
您可能关注的文档
- 抗生素合理应用精华8指南.ppt
- 41-股骨颈骨折内固定术后股骨颈短缩研究进展 二院 李伟龙.doc
- 临床医学英语-附录教材.pdf
- 第八讲 截肢的康复.ppt
- 第七单元:感动中国人物作文素材分类.pptx
- 麻醉科操作常规教学大全.ppt
- 0级实验诊断学重点.doc
- 网球理论试卷摘要.docx
- 落实医疗核心制度,保证基础医疗质量教材.ppt
- 骨科植入物医疗器械公司:创生控股及康辉医疗.docx
- 某某单位2024年党建工作总结及2025年工作计划.doc
- 某某市发改委关于2024年度落实党风廉政建设工作责任制情况的报告.doc
- 某某局2024年全面从严治党和党风廉政建设工作总结.doc
- 某某区财政局2024年法治政府建设总结及2025年工作谋划.doc
- 2024年党管武装工作述职报告2篇.doc
- 2024年度国企党委书记抓基层党建工作述职报告3篇.doc
- 公司党委书记2024年述职述廉报告.docx
- 2024年度乡镇党委领导班子民主生活会(四个带头)对照检查材料.doc
- 市医疗保障局关于2024年法治政府建设工作情况的报告.docx
- 市民政局党组2024年巡察整改工作情况报告.docx
文档评论(0)