紫杉醇生物合成途径和其相关酶的研究进展.pdf

第30 卷 第2 期 河北师范大学学报( 自然科学版) Vol. 30 No. 2 2006 年 3 月 Jour nal of Heb ei Normal Universit y (N atural Science Edition) Mar. 2006 y 紫杉醇生物合成途径及其相关酶的研究进展 1, 2 1 1 肖 颖 , 赵 冬, 王 刚 ( 1. 河北师范大学 生命科学学院, 河北 石家庄 050016; 2. 石家庄学院 化学系, 河北 石家庄 050011) : 紫杉醇的生物合成过程已基本阐明, 其合成 牛儿基 牛儿基二磷酸为前体约需 20 步酶促反 应, 近一半的相关酶基因已得到克隆与表达. 综述了紫杉醇生物合成及生物合成途径中9 个酶基因的克隆和 表达方面的研究进展, 并指出随着紫杉醇生物合成分子生物学研究的不断深入, 利用分子生物技术大规模生 产紫杉醇将为期不远. : 紫杉醇; 生物合成; 相关酶 : Q 78 :A : 10002 5854(2006) 022 02222 07 紫杉醇(paclitaxel, 商品名T axol) 是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的一种次生代谢物, 由于 其具有显著抗癌效果, 现已成为临床上治疗肿瘤的重要药物. 但因资源匮乏, 单纯从含量甚微的天然红 豆杉植物中提取紫杉醇无法满足临床需求, 故紫杉醇的药源问题已引起人们的极大关注. 为此各国科学 家在筛选高产量红豆杉栽培品种、化学合成、生物技术及微生物生产等方面做了大量的研究工作. 由于 目前对紫杉醇的生物合成途径及合成途径中相关酶研究所取得的进展, 已使人们相信基因工程可能成 为生产紫杉醇的途径之一. 本文中, 笔者报道了近年来有关紫杉醇生物合成及生物合成途径中相关酶研 究所取得的进展. 1 对紫杉醇生物合成途径的研究主要采用整体植物或细胞培养物掺入法进行同位素示踪试验和无细 胞酶系体外转化试验. 紫杉醇的生物合成包括紫杉烷环母核结构的巴卡亭Ó的装配和苯基异丝氨酸侧 链的装配. 这两个构造单元在途径中的较后步骤连接, 随后于侧链Cc3 位发生N 苯甲酰化而生成紫杉 醇( 见图1) . 1. 1 紫杉醇是一种双萜化合物, 在植物次生代谢中异戊二烯是合成所有萜类化合物的通用前体, 它在体 [ 1 内经甲羟戊酸途径生成 . 因此, 根据植物萜类次生代谢物的生源途径, 紫杉醇的三环二萜骨架似乎来 [ 2 自甲羟戊酸. Zamir 等 同位素示踪试验曾表明紫杉烷环系统是由甲羟戊酸和乙酸形成的, 但是所报道 的前体的掺入率极低( 0. 02 %~ 0. 12 % ) , 并且未对产物进行化学降解分析而确定标记部位, 因而未能 证实紫杉烷环骨架来自甲羟戊酸途径. Eisenreich 等[ 3 13 C 标记的[U - 13C6 葡萄糖、[ 1- 13C 葡萄糖 和[ 1, 2- 13C 乙酸作前体, 对中国红豆杉悬浮培养细胞进行饲喂试验, 发现产物t axuyunnanine C( 2A, 2 5A, 10B, 14B 四乙酰氧 4( 20) , 11 紫杉二烯) 的4 个异戊二烯单元 完全相同的方式被标记, 其中二碳 单位和三碳单位均来自葡萄糖, 外源乙酸仅标记t axuyunnanine C 的乙酰基侧链而不标记紫杉烷环骨 13 13 架. 通过远程 C- C 偶联分析表明, 在异戊二烯单元的形成过程中发生了分子内重排. 甲羟戊酸途径 无法解释源自葡萄糖的三碳单位存在于双萜化合物中和异戊二烯单元中的放射标记分布方式. 因此, 异 戊二烯单元不可能来自经典的甲羟戊酸途径, 而是通过葡萄糖的初级代谢产物磷酸丙糖与丙酮酸脱羧