第六讲 遗传信息传递-DNA复制.pdf

第六章 遗传信息传递-DNA复制 • 引言：遗传信息的传递及中心法则 – 遗传信息的传递：使DNA的核苷酸顺序转换为 蛋白质的氨基酸顺序。 • 中心法则 • 反义链：DNA双链分子中只有一条链通过 碱基互补原则转录为一条mRNA链，指导合 成RNA的那条链称模板链或反义链。 • 正义链：与mRNA核苷酸序列相同的那条链 （U代替T ），称编码链或正义链。 • 第一节 DNA的复制 • （一）DNA的半保留复制 半保留复制：每个子代的DNA分子中， 一条链是亲代DNA链，另一条链是新合 成的链。 • 1958年Meselson和Stahl • 2 ．冈崎片段与半不连续复制 • 前导链和后随链：复制从DNA分子中富含 AT碱基对的特定起始点开始，在起始点内 先形成复制叉，然后复制叉移动合成DNA 新链。合成新链的方式是半不连续复制， 即一条链是不间断地连续合成，称为前导 链，另一条链是合成不连续片段，称为后 随链。 • 后随链的合成是不连续进行的，先合成许 多片段，即冈崎片段。最后各段再连接成 为一条长链。由于前导链的合成连续进行 的，而后随链的合成是不连续进行的，所 以从总体上看DNA的复制是半不连续复 制。 后随链 前导链 • （二）DNA复制的起始，方向和速度 – （1）复制的起始点。 – DNA复制要从DNA分子的特定部位开始，此特 定部位称为复制起始点。 • 在原核生物中复制起始点常位于染色体的一个特定 部位，即只有一个起始点。 • 真核生物的染色体在几个特定部位进行DNA复制， 有多个复制起点。 • (2 ）复制的方向 • DNA在复制时，双链DNA解旋成两股分别进行。 其复制过程的复制起点呈现叉子的形式，故称复 制叉。以复制叉向前移动的方向为标准，前导链 为3’—〉5’走向，在其上DNA能以5’—〉3’方向连 续合成；后随链为5’—〉3’走向，在其上DNA也 是5’—〉3’方向合成，但与复制叉移动的方向正好 相反，最后连成一条完整的DNA链 • （三）复制的过程和参与酶及因子 • 复制的过程分四个阶段： • 第一阶段，亲代DNA分子超螺旋的构象变 化及双螺旋的解链。 • 第二阶段为复制的引发阶段，有引物RNA 进行5 ′～3 ′方向的合成。 • 第三阶段为DNA链的延长，前导链连续地合成出 一条长链，后随链合成出冈崎片段。去除RNA引 物后，片段间形成了空隙，DNA聚合酶作用使各 个片段靠近。在连接酶作用下，各片段连接成为 一条长链。 • 第四阶段为终止阶段，复制叉行进到一定部位就 停止前进，最后前导链与随从链分别与各自的模 板形成两个子代DNA分子，到此复制过程就完成 了。 • 1　螺旋的松弛与解链 – 包括超螺旋的构象变化及双螺旋的解链，参与 者主要为拓扑异构酶、解链酶及单链结合蛋白 等。 • (1）拓扑异构酶。拓扑异构酶可改变DNA 拓扑性质。 – 在DNA复制时，拓扑酶可松弛超螺旋，还可以 引入负超螺旋，有利于复制叉的行进及DNA的 合成。 – 在复制完成后，拓扑酶又可将DNA分子引入超 螺旋。 • (2）解链酶。DNA复制进行时，首先要在 复制起点处解开双链，反应是在一类解链 酶的催化下进行的。解链酶要通过ATP 的分 解获得能量，以解开双链。 • (3）单链结合蛋白(SSB)。单链结合蛋白与 解开的DNA单链相结合，可稳定此单链以 利于其发挥模板作用。SSB也与复制新生 的DNA单链相结合，以保护其免于被核酸 酶水解。 • 2　引发 – DNA复制开始时，先要有引发阶段，即有引物 RNA的合成。 – 主要的是引发酶及引发前体。 • （2 ）引发体。 – 引发体沿后随链的模板DNA顺复制叉的行进方 向移动，它连续地与