第五单元 基因工程操作程序2.pptVIP

基因工程的基本操作程序 原核细胞的基因结构 原核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 基因的种类 启动子与终止子 基因工程的基本操作流程 基因组文库和部分基因文库 基因组文库和部分基因文库 cDNA合成过程 第一步，反转录酶以RNA为模板合成一条与RNA互补的DNA单链，形成RNA-DNA杂交分子。 第二步，核酸酶H使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解，使之变成单链的DNA。 第三步，以单链DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链，形成双链DNA分子。 利用PCR技术扩增目的基因 获取目的基因 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 利用化学方法人工合成 构建表达载体 表达载体的组成 目的基因 启动子 终止子 标记基因 基因工程载体的构建需要考虑哪些因素 （1）基因的特点：如果一个来自动物的目的基因含有内含子，就不能用于转基因植物，因为动物中内含子的剪接系统与植物的不同，植物不能将动物基因的内含子剪切掉，只能用该基因的cDNA。基因的产物如果是一个糖蛋白，那么该基因在原核生物细菌中表达出来的蛋白就可能不具备天然状态下的活性，因为糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加上的，而细菌无这些细胞器。 （2）要选择强启动子或组织特异性启动子。启动子有强有弱，选择强启动子可以增加转录活性，使基因产物量增多。如果希