* * * * * * * * 5、蛋白质变性原理的应用 (1)促使蛋白质变性 (2)防止蛋白质变性 1、沉淀 ⑴概念 ⑵关键:水化膜的破坏,电荷的消失 ⑶方法 五、蛋白质的沉淀 a、盐析(salting out) 盐溶:蛋白质在低浓度盐中溶解度增加的现象。 盐析:蛋白质在高浓度盐中溶解度降低析出的现象。 等电点沉淀的蛋白质溶液中加入NaCl后沉淀溶解—盐溶 提问:原因? 盐溶—盐析 分子在等电点时,相互吸引,聚合沉淀,加入少量盐离子后破坏了这种吸引力,使分子分散,溶于水中 盐溶 盐析 向蛋白质溶液中加入大量硫酸铵后蛋白质会沉淀析出 提问:原因? 蛋白质分子表面的亲水区域,聚集了许多水分子,盐浓度高时,这些水分子被盐抽出,暴露出的疏水区域相互结合,沉淀。 盐析((NH4)2SO4 b、有机溶剂沉淀法 ● 原理 c、重金属沉淀法 ● 原理 d、生物碱试剂 六、蛋白质的颜色反应 自学 第6节 蛋白质的研究方法 一、蛋白质含量的测定 1、凯氏定氮法 2、紫外吸收法 3、…….. 蛋白质是由一条或多条多肽(polypeptide)链以特殊方式结合而成的生物大分子。 蛋白质与多肽并无严格的界线,通常是将分子量在6000道尔顿以上的多肽称为蛋白质。 蛋白质分子量变化范围很大, 从大约6000到1000000道尔顿甚至更大。
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