酶法提取4种淡水鱼鱼鳞胶原蛋白的研究.PDFVIP

第29卷第4期 水产 科 学 Vol-29NO．4 2010年4月 FISHERIESSCIENCE Apr．20lO 酶法提取4种淡水鱼鱼鳞胶原蛋白的研究 刘 艳，刘章武，唐婧苗，吴绍武 (武汉工业学院食品科学与工程学院，湖北 武汉430023) 摘要：对4种常见淡水鱼鱼鳞的基本成分和氨基酸组成进行了测定，研究了酶解鱼鳞制备水解胶原 蛋白的工艺，并采取正交试验对水解条件进行了优化。试验结果表明，淡水鱼鳞主要由蛋白质和灰分 组成。粗蛋白含量高达55％以上；氨基酸组成显示淡水鱼鳞羟脯氨酸含量丰富。是制备水解胶原蛋白 的良好原料。正交试验结果表明，55℃、E／S3％、酶解2h、料液比1：10(即底物质量浓度为100 g／L) 时水解效果最好，此时，水解产物分子量较小，且分布集中。 关键词：淡水鱼；鱼鳞；酶解；胶原蛋白 中图分类号：TS254．5 文献标识码：A 文章编号：1003—1111(2010)04—0221—04 鱼鳞是鱼体与外界接触的边缘组织，起到保护 为废弃物而未得到充分的回收利用，据统计，我国 鱼体免遭损害的作用。鱼鳞占鱼体总质量的1％～ 每年废弃的鱼鳞约有30×IO‘t，不仅浪费了资源， 5％，其中几种常见淡水鱼鱼鳞为鱼体总质量的 还造成了环境污染[5]。目前我国胶原蛋白年需求 2．5％[1]。鱼鳞含有丰富的蛋白质和各种矿物质，量超过3000t，每年还将以50％的速度增长。传统 主要由蛋白质和羟基磷灰石组成。蛋白质占鱼鳞 用于提取胶原蛋白的原料主要为猪、牛等陆生动物 总质量的50％--一70％，主要为胶原蛋白和角蛋白，的皮和骨，但近年由于疯牛病、口蹄疫等流行病的 还含有少量球蛋白等。胶原蛋白主要分布在鱼鳞 发生，不少发达国家已经禁止使用从牛皮和牛骨中 的内层，完整结构的胶原蛋白是一种纤维蛋白，通 提取胶原蛋白[6]。鱼鳞已成为一种提取胶原蛋白 常由3条多肽链构成3股螺旋结构，具有较强的机 械强度，不溶于冷、温水，也不溶于酸、碱或盐的稀 auratus)、鲤 godongodonidells)、鲫鱼(Carassius 溶液中，当温度升高或者在酶的作用下，胶原蛋白 鱼(Cyprinus 的三螺旋结构遭到破坏，溶解性大大提高，达到 thysmolitrix)的鱼鳞的基本组成，并选择草鱼的鱼 90％以上[2]。角蛋白为硬蛋白的一种，具有纤维结鳞进行酶解试验，对鱼鳞酶法水解制备胶原蛋白的 构，在水、盐类溶液及稀的酸、碱溶液中完全不溶 工艺进行了探索，为进一步开发利用淡水鱼鱼鳞提 解，在100℃的热水中也不能溶解，必须用200℃供一些参考。 加压蒸煮30min，才能完全溶解[3]。球蛋白等含量 1材料与方法 较少，易溶，在鱼鳞反复清洗和前处理过程中易被 除去。鱼鳞含30％灰分，主要为羟基磷灰石[Ca．。1．1材料与试剂 (OH)z(PO。)。]，还含少量碳酸钙、磷酸镁、磷酸钠草鱼、鲤鱼、鲫鱼、鲢鱼鱼鳞(常青花园菜市场 收集)。碱性蛋白酶(食品级，南宁庞博生物工程有 等无机盐[t]。由于胶原纤维被磷灰石所粘附，所以 在提取胶原蛋白时要加强脱钙，以便于胶原脱离磷 限公司)、L-羟脯氨酸(Sigma)、盐酸、硫酸、高氯酸、 灰石晶格的束缚而溶出。羟基磷灰石等盐类不溶 氢氧化钙、氢氧化钠、柠檬酸、氯胺T、乙二醇独甲 于水，但可用盐酸或亚硫酸来取代，使之变成可溶 醚、二甲基氨基