TRIM21促进T淋巴细胞凋亡的分子机制及临床应用价值分析.pdfVIP

上海医学2012年第35卷第2期 · 137· ·基础与危重医学● TRIM21促进T淋巴细胞凋亡的分子机制 及临床应用价值分析 谢军 万小健卞金俊 【摘要】 目的 探讨E3连接酶TRIM21在anti-Fas诱导的T淋巴细胞凋亡中的作用及其分子机制，为评 价TRIM21在临床上的应用奠定基础。方法构建TRIM21真核表达载体，设计TRIM21干扰片段，分别将它 们过度表达于JurkatT淋巴细胞中。将流式细胞仪分选的阳性细胞分为空载无药物组、空载药物处理组 20 20 (anti-Fas h)、TRIM21无药物组和TRIM21药物处理组(anti-Fash)分别进 ng／mL处理3 ng／mL处理3 siRNA的JurkatT淋巴细胞分为对照siRNA 行药物处理，将转人对照双链小干扰RNA(siRNA)与TRIM21 20 siRNA 无药物组、对照siRNA药物处理组(anti—Fas h)、TRIM21siRNA无药物组和TRIM21 ng／mL处理3 20 药物处理组(anti—Fasng／mL处理3h)，并采用AnnexinV／碘化丙啶双染法测定JurkatT淋巴细胞的凋亡 率。将分选JurkatT淋巴细胞分为空载组和TRIM21过表达组，分别采用蛋白质免疫印迹法与实时定量聚合 响。结果空载药物处理组的JurkatT淋巴细胞凋亡率显著高于空载无药物组(PO．001)．TRIM21药物处 理组的Jurkat T淋巴细胞凋亡率显著高于对照siRNA无药物组(PO．001)，但TRIM21siRNA药物处理组的JurkatT淋巴 导细胞凋亡的敏感性。 【关键词】T淋巴细胞凋亡；TRIM21；c-FLICE抑制蛋白 MolecularmechanismsofTRIM21-indUCedTcell and、tsclinical Jun。WAN apoptosis significance‘xlE 。DeportmentofClinicalLaboratory，HospitalofXuyu．Xuyu Xiaojian，日伪～Jinjun． 211700．Jiangsu．Cnina authorBIAN l Corresponding Jinjun．E-mail：jinjunb@gnoil．corn To theeffectofE3 TRIM21onanti-Fas-inducedTcell [Abstract]Objectiveinvestigate ligase apoptosis aswelIasjtsmolecularmechanism，,soasto evidencefortheclinicaI ofTRIM21．Methods provide application vector TRIM21 wasconstructedandTRIM21 wastransfectedinto