水稻胚性愈伤诱导及其遗传转化的几个技术参数研究.pdfVIP

( ) 394 核 农 学 报 　2008 ,22 4 :394～398 　 J ournal of N uclear Agricultural Sciences ( ) 文章编号 2008 0439405 水稻胚性愈伤诱导及其遗传转化的几个技术参数研究 李 　毓 　洪国琴 　庄伟建 　王乃元 　戴 　非 　张国林 　张燕云 　仇秀丽 (福建农林大学作物科学学院 ,福建福州 　350002) 摘 　要 : 以日本晴成熟种子及幼嫩种子为材料诱导形成胚性愈伤组织 ,经农杆菌介导将水稻隐花色素基 因的4 个 RNAi 和 2 个反义 RNA 表达载体分别转化 日本晴愈伤组织 ,再经抗性筛选和分化培养诱导形 成植株 ,经分子检测筛选出阳性转基因苗 。对胚性愈伤诱导率 、抗性愈伤率 、分化出苗率及转化率进行 统计分析 。结果表明 ,成熟种子 、新鲜成熟种子及幼嫩种子愈伤诱导率均大于 81 % ,平均为 8667 % ,其 中以新鲜成熟种子愈伤诱导率最高 , 达 9689 % ; 抗性愈伤率成熟胚为 222 1 % ～4071 % , 平均为 2849 % ,幼胚为 3679 %～432 1 % , 平均为 40 % ,幼胚的抗性愈伤率高于成熟胚 ;分化出苗率成熟胚为 5929 %～8043 % ,平均为 7159 % ,幼胚为 6316 %～7273 % ,平均 6795 % ,幼胚与成熟胚差异不明显 ; ( ) 转化率 Gus 检测阳性率 成熟胚为 4307 %～8108 % ,平均 6159 % ,幼胚为 5833 %～7667 % ,平均 6750 % ,幼胚转化率稍高于成熟胚 。 关键词 :水稻 ;胚性愈伤诱导率 ;抗性愈伤率 ;分化出苗率 ;转化率 STUDIES ON RICE EMBRYO GENIC CALL US IND UCTION AND SEVERAL TECHNICAL PARAMETERS FOR THEIR GENETIC TRANSFORMATION L I Yu 　HON G Guoqin 　ZHUAN G Weij iang 　WAN G Naiyuan 　DAI Fei ZHAN G Guolin 　ZHAN G Yanyun 　QIU Xiuli ( College of Crop Sciences , Fuj ian Agriculture and Forestry University , Fuzhou Fuj ian 350002) Abstract :Mature and young seeds of j aponic rice cultivar “Nipponbare ”were used as materials to induce and produce embryogenic callus. Four RNAi and two antisense RNA expression vectors of rice cryptochrome gene were transformed into these callus tissue mediated by agrobacterium tumefaciens. Induced plants were obtained by resistance sc