可用于基因检测的啤酒发酵液DNA提取方法研究.PDF

※生物工程 食品科学 2007, Vol. 28, No. 03 191 李艳琴，孙永艳 ( 山西大学生物技术研究所，化学生物学与分子工程教育部重点实验室，山西 太原 030006) ： 用玻璃珠法、溶菌酶法、冻融法、氯化苄(phCH2Cl)法提取啤酒发酵液、生产用啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae － + )、K氏酵母、啤酒生产污染细菌(T)、G 细菌 (E.coli. DH5α)和G 细菌(BacillusYK-1R)的基因组DNA。 溶菌酶法和冻融法对细菌的裂解率为99%～100%，对酵母的裂解率只有15%～28%；玻璃珠法对酵母的裂解率为 92%～94%；phCH2Cl 法对细菌和酵母的裂解率均为100%。对提取的啤酒发酵液基因组DNA 浓度进行测定，结 果为：玻璃珠法15.4g/ml、溶菌酶法18.0g/ml、冻融法13.8g/ml、phCH2Cl法40.7g/ml。电泳检测结果表明，除 冻融法外，其余3 种方法得到的混合菌DNA 片段均大于23kb，无拖尾、无蛋白污染。phCH2Cl 法图谱更清晰， DNA 得率108μg/g 湿菌体，RAPD-PCR 图谱重复性好。为用基因诊断技术在线检测啤酒发酵过程中微生物污染， 提供了一种可靠的DNA 提取方法。 ：啤酒发酵液；D N A 提取方法；P C R 扩增 Study on DNA Extraction Methods from Fermented Beer Liquid for Genic Detection LI Yan-qin，SUN Yong-yan (Key Laboratory Chemical Biology and Molecular Engineering, Ministry of Education, Institute of Biotechnology, Shanxi University, Taiyuan 030006, China) Abstract ：Genome DNA was respectively extracted from fermented beer liquid, beer yeast (S.cerevisiae), yeast(K), beer- E.coli.DH5α and Bacillus YK-1R by various methods to produce different cell-disruption efficacy. contaminating bacteria(T), 收稿日期：2006-03-31 基金项目：山西省科技攻关计划项目(041147) 作者简介：李艳琴 (1960-)，女，副教授，研究方向为微生物分子生物学。 4 结 论 [3] 王关林, 方宏筠. 植物基因工程原理与技术[M]. 北京: 科学出版社, 1998. 4.1 建立了较适合于加工番茄(代号98-75)的遗传转化体系。 [4] 萨姆布鲁克 J, 弗里奇 E F，曼尼阿蒂斯 T. 分子克隆[M]. 金冬雁,