分子印迹固相萃取技术测定血清和尿液中16种β-受体激动剂药物.pdfVIP

Feed and 2016年第52卷第23期 ProcessingTesling·饲料加工与趋潮 分子印迹固相萃取技术测定血清和尿液中 16郴一受体激动剂药物 李婷婷1，李 溱2，李藏兰1，贺平丽卜 (1．中国农业大学动物科学技术学院，动物营养学国家重点实验室，北京100193； 2．中国农业大学生物学院，植物生理学与生物化学国家重点实验室，北京100193) 摘 要：本研究建立了利用分子印迹固相萃取前处理技术结合液相色谱一串联高分辨质谱技术检测绵羊血清 和尿液中的16种口一受体激动剂类药物的方法。尿液和血清样品经乙酸铵缓冲液提取，分子印迹固相萃取小柱 富集和净化，Ad锄tisT3C，。色谱柱分离，最后采用质谱一级全扫和数据依赖型二级扫描模式进行定性和定量分 析。结果表明：16种药物的线性范围在0．叭～50n咖L，检出限为0．005～0．153n∥mL。不同添加浓度下，16种JB一受 体激动剂在血清和尿样中的添加回收率为62％～115％，相对偏差小于15％。 关键词：肛受体激动剂；分子印迹固相萃取；液相色谱一串联高分辨质谱；血清；尿液 中图分类号：S816．7 文献标识码：A 文章编号：0258—7033(2016)23—0073—05 肛受体激动剂，俗名“瘦肉精”，具有促进动物体 分辨质谱技术，建立血清和尿液样本中16种口一受体 蛋白质沉积、脂肪分解和抑制脂肪沉积等效果…，从 激动剂类药物的确证和定量分析方法，从而克服由 而被用于养殖业，用以增加瘦肉率、提高生长性能和 于样品复杂所带来的内源性干扰问题。 降低饲养成本，但其在动物组织中的残留有较强的 l材料与方法 毒副作用f2】。因此，欧盟和我国已经全面禁止争受体 激动剂类药物在养殖业中的使用。伊受体激动剂类 1．1 仪器与设备超高效液相色谱：watersAcQuITY 药物的检测包括样品前处理及高级仪器分析两部 uPLc Fisher公司；分子 分，目前，常用的前处理技术主要有液液萃取【3】、固 分辨质谱：Q—Orbitrap，美国ne珊o 相萃取【4l、免疫亲和萃取嘲等。仪器分析主要有高效液 印迹(M01eculdyimprinted 相色谱(HPLC)【6】、液相色谱一串联质谱(LC—MS／MS)【7】MIP mL)，美 柱：Supel SPE—Beta—agonists(25mg，10 和气相色谱一质谱联用技术(GC—MS)18】，其中 scientific LC—MS／Ms是目前最常用的确证方法。 Scientific有限公司；氮吹仪：美国Ameritech 分子印迹固相萃取是近年来发展起来的一种新 有限公司；离心机：美国Beckman公司。 型前处理技术，具有高度的选择性，同时还具有耐高 1．2试剂与材料本试验所用16种标准品(溴布特 温和抗酸、碱、有机溶剂等优良特性。目前，该技术 罗、西马特罗、克伦普罗、氯丙那林、马布特罗、妥布 主要用于三聚氰胺、激素类、磺胺类和喹诺酮类等药 特罗、丁酚胺、菲诺特罗、异舒普林、利托君、克伦特 物的检测【9】，但在肛受体激动剂类药物检测方面研 罗、莱克多巴胺、吗喷特罗、拉贝特罗、异克伦潘特 究较少，且现存方法只能有效净化一种或少数几种 和福莫特罗)以及2种内标物质(克伦特罗一D。和莱克 口一受体激动剂类药物【4l。因此，本研究拟利用分子印 多巴胺一D。)，均购自美国SigIIla公司。液质联用