坛紫菜配子体离体细胞发育研究.pdfVIP

第40卷第12期 中国海洋大学学报 2010年12月 PERl(JDlCALOF(X：EANUNIVERSITY()FCHINA Dec．，2010 坛紫菜配子体离体细胞发育研究’ 王 莉，孔凡娜，茅云翔”，杨 惠 (中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室。山东青岛266003) haitanensiset 摘要：本文以坛紫菜(PorphyraChangZheng)雌雄配子体为材料，酶解得到单细胞并再生培养，研究雌 雄配子体体细胞发育途径以及不同部位(根丝段、基部、中部、顶部、成熟区)单细胞发育途径。结果表明，坛紫菜雌雄配子 体体细胞发育途径大致相同，但存在一定差异，表现为雌性配子体体细胞发育成果孢子囊，少数体细胞直接发育成类孢子 囊枝；而雄性配子体体细胞发育成精子囊，并能释放精子，极少数体细胞发育成类果孢子囊。单细胞再生研究显示，配子 体体细胞发育方向受细胞所处部位影响，不同部位体细胞由于其分化程度不同。发育成不同类型的再生体。随着细胞所 在藻体部位的上移，正常叶状体和根丝细胞叶状体比例均下降，畸形叶状体的比例下降或无明显差异，丝状体的比例逐渐 增加。 关键词：坛紫菜；雌雄配子体；单细胞；发育分化 中图法分类号： Q343 文献标志码： A 文章编号： 1672—5174(2010)12-081-08 haitanensiset 坛紫菜(Porphyra ChangZheng)培养获得新的叶状体，证明了紫菜细胞发育的全能性。 是我国特有的大型经济海藻，在福建、浙江、广东北部 沿海被大规模栽培，经济和社会效益显著。坛紫菜生 Kjellm)配子体体细胞和原生质体，并进一步培养成正 活史为异型世代交替类型，由大型配子体(叶状体)世 代和微型孢子体(丝状体)世代构成的；绝大多数配子 体个体是雌雄异体，少数为雌雄同体[1]。雌雄配子体 织以及在愈伤组织边缘萌发形成叶状体。曾庆国[7]利 成熟后分别产生果胞和精子，通过有性生殖产生果孢 用酶法分离坛紫菜叶状体单细胞发现有3种不同的发 子，果孢子萌发成为孢子体；孢子体成熟后释放出壳孢 育途径，并探讨了单细胞发育成丝状体的情况。严兴 子，经减数分裂发育成配子体[1]。一般认为，壳孢子在 洪等[11]系统地研究了坛紫菜雌雄配子体的细胞发育分 萌发时进行减数分裂[2]，而且分裂形成的细胞不分离， 化过程，发现雌雄配子体体细胞再生体中，均出现9种 因此其配子体不同部位细胞基因型存在差异，为遗传 不同发育类型，再生体发育类型的数目和比例与种藻 学上的嵌合体。开展坛紫菜雌雄配子体不同部位细胞 日龄密切相关。但上述研究未对坛紫菜单性配子体不 发育分化差异研究，不仅对进一步阐明海藻生长发育 同部位的细胞发育分化途径差异进行深入的探讨。本 和细胞分化理论有重要意义，而且为开展坛紫菜遗传 文以实验室单株隔离培养的坛紫菜雌雄配子体为材 学研究提供重要参考。通过分离紫菜配子体细胞在离 料，通过酶解法获得不同部位的单细胞进行再生培养， 体条件下培养，观察再生体的形态结构、发育形式以及 研究坛紫菜雌雄配子体的细胞发育分化异同点，以及 趋势是研究紫菜配子体细胞发育分化途经的有效方法 配子体单细胞发育分化与细胞所在部位的关系，在细 之一。由单个细胞发育而来的再生体，无论是配子体 胞水平上为坛紫菜遗传育种研究提供实验依据。 还是孢子体都具有纯合性高、可稳定遗传的特性，因此 酶解单细胞获得纯系材料可为坛