《边做边学 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳》导学案1.docVIP

《边做边学 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳》导学案 【学习目标】 1、 掌握分离与测定生物成分中蛋白质的技术 2、 掌握采用醋酸纤维薄膜电泳的方法分离并纯化蛋白质 3、 掌握采用水蒸气蒸馏法和脂溶性有机溶剂提取法提取脂肪成分 【学习重点】 【课前自主导学】 1、 类型沉降法和薄膜透析法分离蛋白质 (1)细胞中蛋白质的释放：在提取蛋白质时，可采用_____________和__________________结合的方法将生物组织或细胞__________________，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提取液中。 (2)抽提液的选择：要根据蛋白质___________的而定，一般酸性蛋白质用__________________溶液抽提，碱性蛋白质用______________________溶液抽提，脂蛋白等则可用__________________抽提。 (3)离心沉降法分离蛋白质：通过控制__________________，使__________________、__________________的蛋白质发生沉降分层，从而达到分离出不同种类蛋白质的目的。 (4)薄膜透析法分离蛋白质：利用蛋白质分子不能通过______________的特性，使蛋白质与其他__________________分离开的纯化蛋白质的方法。 2、凝胶色谱法分离蛋白质 (1)凝胶色谱法的概念：是根据______________________，对其进行有效分离的方法。 (2)凝胶：①组成：由__________________凝结而成的固体物质。 ②成分：由__________________、__________________等多糖类化合物。 ③结构：小球体内部具有很细微的__________________结构。 (3)分离蛋白质的原理：①大分子蛋白质不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙移动，洗脱路程_____________，移动速度________________，最先流出柱外。 ②小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构，洗脱路程_____________，移动速度________________，以致较长时间流出柱外。 2、 蒸馏 (1)蒸馏的概念：将液体加热至沸腾，使液体变为_____________，然后使蒸汽冷却再凝结为_____________，这两个过程联合操作称为蒸馏。 (2)蒸馏分离物质的原理：蒸馏可以将________________和________________的物质分离开来，也可将液体混合物中________________不同的物质分离开来。 4、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳 实验步骤 操作方法 配制试剂 配制巴比妥溶液、染色液、漂洗液、透明液 架滤纸桥 取双层滤纸，一端与________________对齐，另一端浸入电泳槽的________________，待滤纸条________________，驱除________________，使滤纸紧贴于支架上 浸泡薄膜 取出醋酸纤维薄膜，识别出________________，并在一角用笔做上记号，然后放在________________________________中浸泡20min 细心点样 取出薄膜，吸去多余的液体，平铺在玻璃板上，有平记号的一面_____________。点样时用________________在______________中蘸一下，在离薄膜一端2～3cm处轻轻按下，随即提起 平悬薄膜 将点样端平贴在电泳槽________________支架的“滤纸桥”上，有记号的一面________，另一端平贴于________________，呈________________状态 实施电泳 盖上___________________，电泳60～90min 染色 取下薄膜，放入________________中浸泡5～10min 漂洗 取出薄膜，在________________中漂洗数次，直至蛋白质区_____________________为止 脱色 用滤纸压平并吸干薄膜后，再浸入________________中约5min，取出后平贴于玻璃板上，待完全干燥后便成________________________________，可长期保存 5、提取橘皮中的芳香油 (1)橘皮芳香油具有诱人的菊香味，其主要成分是________________。 (2)水蒸气蒸馏法：①适用范围：适用于能_________________________而不被破坏的物质成分的提取。 ②操作步骤：将橘皮_____________与适量的________放入蒸馏瓶→点燃________________，实施 __________