鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验教案.pptVIP

Ames试验，即污染物致突变性检测，也称为鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验 污染物对人体的潜在危害，引起人们的普遍关注。世界上已发展了百余种短期快速测试法，检测污染物的遗传毒性效应。B.N.Ames等经十余年努力，于1975年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验（亦称Ames试验）已被世界各国广为采用。 ?原理：检测受试物诱发鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型突变株(his-)回复突变成野生型(his+)的能力。即组氨酸突变菌(his-) 在不含组氨酸的最低营养平皿上不能生长；回复突变成野生型(his+)，可在不含组氨酸的最低营养平皿上生长。 ?是应用最广泛的检测基因突变的体外试验。 ? Ames试验 标准试验菌株(配套菌株)：有四种 TA98、TA97 ：检测移码突变 TA100：检测碱基置换突变 TA102：对醛、过氧化物及DNA交联剂较敏感 这四个试验菌株除了含有his-突变，还有一些附加突变，以提高敏感性 ? Ames试验 ?不加S9 混合液得到阳性结果，说明受试物是直接致突变物 ?加S9 混合液才得到阳性结果，说明该受试物是间接致突变物 ? Ames试验 常规方法： ?斑点试验 ?平板掺入试验 斑点试验： 1、吸取测试菌增菌培养后的菌液0.1ml，注入融化并保温45℃左右的上层软琼脂