2010年度1月文献汇报.ppt

IL-16 signaling specifically induces STAT6 activation through CD4 Centocor Research and Development, Radnor, PA 19087, USA 摘要 IL-16的生物活性诸多报道，但是关于信号传导方面很少见。 探讨在CD4参与下IL-16 的生物活性。作者研究了IL-16 激活后的初始人类外周血单核细胞（PBMCs ）和人类单核细胞系THP1中STAT蛋白的活性状态。在检测过的4个STAT 蛋白中，发现只有STAT-6通过IL-16 以剂量依赖式被激活。 而用可溶性CD4预处理掉IL-16的细胞中，STAT-6的激活会被完全取消。并证明STAT-6的激活需要CD4 的参与。 作者首次证实了IL-16与STAT-6活化之间的关系。 引言 1982年首次证实IL-16 作为T细胞的一个化学诱导因子，由人外周血单核细胞分泌。由caspase-3裂解IL-16的631个氨基酸前体，产生具有生物活性的121个氨基酸蛋白。 已证实在CD8+T细胞，用一系列刺激如组胺、抗原、5-羟色胺、GM-CSF、PMA、C5a 作用下，在1-4 小时内会释放存储量80%的IL-16。而其它分泌IL-16 的细胞在特殊抗原、IL-4、GM-CSF、IL-1B刺激下，会在12到14小时内持续分泌IL-16 蛋白前体，这些前体在释放前需要caspase-3裂解。 IL-16通过结合到CD4细胞TCR复合体的D4区发挥生物作用，IL-16的很多生物活性，例如CD4+的趋化性，上调CD25、IL-4、IL-1β的表达，促使细胞进入G1期并抑制细胞增殖等。 引言 目前关于信号传导的报道，都是关于IL-16结合CD4受体之后的。IL-16 不会诱导P56 lck的磷酸化，但会导致P56lck和胞质尾区的CD4受体分子胞浆内功能域相结合。 关于蛋白激酶C（PKC）的研究，已证明IL-16引起PKC从胞质到胞膜的易位，PKC又可以刺激P38MAPK（P38细胞分裂素(丝裂原)活化蛋白激酶）、原致瘤基因（C-jun）和stress-signaling kinase1（SEK1）活化，但IL-16刺激后的结果仍不清楚。 假设IL-16引起其它细胞因子的表达，和其它细胞因子的分泌是依靠STAT的激活。作者假设CD4+细胞受到IL-16的刺激，将会导致一个或更多STAT蛋白的激活， 作者首次证实了IL-16 刺激CD4+细胞导致STAT-6的特殊激活，是依赖于IL-16和CD4的相互作用。 材料和方法 2.1. Soluble human CD4 vector construction 2.2. Soluble human CD4 protein expression 2.3. Soluble human CD4 purification 2.4. Cell culture, PBMC preparation, and IL 16 stimulation 2.5. Western blot analysis 2.6. Flow cytometric analysis 结果（一） IL-16 引起STAT6磷酸化 结果（二） 结果（二） 结果（三） IL-16通过CD4使STAT6磷酸化 讨论 目前研究，作者证实IL-16 可以通过CD4诱导STAT6磷酸化，现有数据证实，大量的CD4+细胞对IL-16应答敏感（尽管有少量CD4-细胞），同时也证实可溶性的CD4分子完全抑制STAT6磷酸化。少量的CD4-细胞对IL-16的应答可能是CD9+细胞，因为显示CD9+细胞可以与IL-16 结合。作者没有用抗CD4mAb结合CD4受体，进而阻断IL-16活化。进一步研究将倾向于是否IL-16通过CD9+去诱导信号从而激活STAT6。 STAT6是STAT蛋白家族成员之一，当激活后会快速转移到胞核，在核内激活或抑制靶基因的表达。之前，已证实大概有35个STAT6调节位点受STAT6调节，也有研究证实它参与IL-4诱导STAT6的磷酸化，有趣的是，IL-4上同样包含一个STAT6的结合位点。众所周知，IL-16 刺激细胞导致CD4+细胞的IL-4 表达，IL-4的表达好像也是由STAT6活化引起。 讨论 用IL-16刺激静息CD4+T细胞导致细胞内钙的释放，这种钙释放是由于P56lck 的活化。之后又证实，P56lck的活化对IL-16的所有功能来说，并不是必须的，但是P56lck 与胞质尾区的CD4受体分子胞浆内功能域相结合相关，显著介导IL-16的其它作用（如对CCR5和CXCR4作用）。接下来的信号级联放大作用是磷脂酰肌醇1，4，5三羟甲基的活化，导致IL-2受体表达增加。在C