2014-2015学年人教版选修1专题2课题1微生物的实验室培养与分离课件(共32张).ppt

1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 用手触摸，刚刚不烫手时 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 灼烧灭菌，防止瓶口的微生物的污染 有关问题 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 3.为什么将平板倒置？ 2、纯化大肠杆菌 平板划线法: 稀释涂布平板法: (1) 接种方法 ...连续划线，...逐步稀释... ...梯度稀释，...分别涂布... 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 .将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 .将试管通过火焰，并塞上棉塞 火焰 冷却 三至五 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 避免接种环温度太高，杀死菌种 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中 取少量稀释液滴加到培养基表面 待酒精燃尽后冷却8～10s 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃灼烧 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 稀释涂布平板法 (3)菌种培养： 将接种的培养基（至少3个）和一个未接种的培养基倒置放入37℃的恒温箱中。 (4)实验结果观察: ①未接种的培养基表面是否有菌落生长？ ②菌落的形态、大小、颜色？ (5)菌株的保存方法 4℃冰箱保藏 甘油管藏（-20℃） 临时保存： 长期保存： 固体斜面 纯化大肠杆菌的实验是否需要设置对照实验？ 【例2】进行细菌接种培养实验时，以下哪个操作步骤是非必要的？ A．双手带上胶手套 B．接种前后都灼烧接种环 C．接种前后都灼烧菌种试管口和待接种斜面 试管口 D．要丢弃带菌培养基前，进行高压蒸汽灭菌 或加热灭菌 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 一、筛选菌株 无机盐 碳源 氮源 凝固剂 尿素是唯一氮源的选择培养基 二、统计菌落数目 用什么方法统计？ ①稀释涂布平板法 ②显微镜直接计数 一般选择菌落数在 的平板进行计数。 统计菌落数往往比活菌的实际数目 。 30-300 低 （酵母菌）血球板计数法 2.计算公式 每克样品中的菌落数＝（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 稀释涂布平板法统计菌落数目 1.理论依据： 　　恰当的稀释度是成功地统计菌落数目的关键。为了保证结果准确，通常将几个稀释度下的菌液都涂布在平板上，培养后再选择菌落数在30～300的平板进行计数。 三、设置对照 目的：排除无关变量（非测试因素）的影响，提高实验结果的可信度。 (1)空白对照：培养基是否有杂菌污染 (2)牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基对照： 选择培养基是否有选择作用。 选择培养基上的菌落数较少。 微生物的培养和应用 课题1 微生物的实验室培养 一、培养基 1、概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质。 一般都含有 四类物质，此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。 2、营养成分： 碳源、氮源、水、无机盐 pH 特殊营养物质 O2 3、分类： 按形态划分 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 微生物在 培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落 固体 （由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，就是菌落） 根霉 曲霉 青霉 按用途划分 基础培养基： 鉴别培养基: 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基） 用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。在培养基中加入特殊营养