遗传 特征分析（副本）.pdfVIP

维普资讯 第 34卷 第 6期 海 洋 与 湖 沼 Vo1．34．No．6 2003年 11月 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA NOV．，2003 缢蛏 (Sinonovaculaconstricta)生化 遗传特征分析 * 李太武 王冬群 苏秀榕 (宁波大学生命科学与生物工程学 院 宁波 315211) 提要 于 2001年 4月 ，在浙江近海采集 100个缢蛏样 品，采用 聚丙烯酰胺垂直板不连续 电 泳方法 ，对缢蛏足 、水管 、消化腺 、外套膜 、鳃等 5种组织或器 官进行 了 EST、ADH、MDH、IDH、 ME、G6PDH、LDH、ALP、GDH、CAT、ALP、ACP、SOD、SDH、ATP、SUDH、GCDH、AMY、GAD、P0D等 20 种 同工酶 的电泳研究 ，并对各种酶 的同工酶位点及酶谱表型进行 了分析 。结果表 明 ，所测组 织 中未检 出CAT、ALP、GCDH、GAD；AMY和 ACP只在消化腺 中有表达 ；SUDH只在水管、鳃 、消 化腺 中表达 ；所检测 的酶均不 同程度地表现 出了组织差异 。 关键词 缢蛏 ，同工酶 ，生化遗传分析 中图分类号 o789 缢蛏 (Sinonovaculaconstricta Iamarck)隶属 于软体动物 门 (Mollusca)、瓣鳃 纲 (LameUi． branchia)、真瓣鳃 目(Eulamellibranchia)、蛏科 (Pharellidae)，是我 国与 日本特有 的种类 ，也是 100多年来我 国浙江省养殖 的重要 贝类 良种之一。据统计 ，1997年 ，仅浙江省缢蛏养殖面积 就达 20447km2，产量为 186390t，是浙江养殖面积和产量最大的贝类 (尤仲杰等 ，2OOO)。近几 年来 ，随着育苗技术的发展和相对成熟 ，养殖容量还在不断扩大。但是缢蛏抗病力下降，养 殖病害时有发生 ，造成这一结果的外在原 因是养殖密度过大 、生态环境恶劣 ，内在原 因则是 缢蛏的遗传变异。有关资料已表 明，一个物种 的种质退化与该物种遗传多样性 的减少或丧 失有直接 的关系(刘玲玲等 ，1998)。 目前 ，对缢蛏 的研究主要集 中在组织学、养殖技术及苗 种培育等方面 ，生化遗传学方面的研究较少。有关其它水生动物生化遗传分析 的研究则 已 有较多的报道 (徐成等 ，2001；王可玲等 ，1996)。本文中报道 了对缢蛏 5种组织 中的 20种 同工酶进行检测分析 的结果 ，旨在为贝类学研究积累资料 ，同时为进～步研究缢蛏遗传特异 性和遗传多样性 、种质鉴别和保护 、生物进化等问题提供一定的理论参考。 1 材料 与 方 法 1．1 材料来源及样 品制备 100只缢蛏于 2001年 4月采 自宁波象山港 ，进行活体解剖 ，取足 、消化腺 、外套膜 、水 管、鳃等 5种组织。将部分样 品的组织称重后 ，在蒸馏水 中洗净 ，按 1：3(W／V)的比例加入 * 宁波市科技局重 点资助项 目，000N0100．01号 。李太武 ，男 ，出生 于 1955年 l2月 ，博士后 ，教授 ，博士生导师 E-mail：litaiwu@hotmail．corn 收稿 日期 ：2002-09．25，收修改稿 日期 ：2003．06．25 维普资讯 6期 李太武等 ：缢蛏 (Sinonomculacogstricta)生化遗传特征分析 641 含0．05％巯基 乙醇 的预冷 重蒸 水 ，冰浴 下研磨 ，然后在 4c=【条件 下离 心 (12000r／rain， 30rain)，取上清液分装编号，作组织酶液 电泳用 。其余样 品编号保存于 一7Oc=【超低温冰箱 中备用 。 1．2 凝胶及 电泳 采用北京六一仪器厂生产 的稳压稳流型 电泳仪进行不连续聚丙烯酰胺凝胶 电泳 ，方 法参照胡能书等 (1985)