第一章：改良角膜表面镜片术法建立兔曲霉菌性角膜炎动物模型.pdfVIP

主堡塞堕里型盘查!!!!生!旦筮!!鲞箜!塑璺!也』墨翌Q业!!!!堡!!：!!!型!型垫!!：!!!：!!：坠：! ·10l· ·实验研究· 改良角膜表面镜片术法建立兔曲霉菌性角膜炎 动物模型 刘廷 徐园园 陈豪 谢立信 【摘要】 背景真菌性角膜感染动物模型是研究真菌性角膜炎发病机制的工具，目前的制作方法主要 有划痕法、基质注射法和角膜表面镜片术法，但均有其不足之处。 目的 探讨一种简便、易操作的改良兔曲 霉菌性角膜炎动物模型制作方法。 方法 成年新西兰白兔18只，采用烟曲霉菌孢子附贴滤纸片的改良角膜 表面镜片术法制作真菌性角膜炎动物模型。将浸有108孢子／ml(108孢子／ml组，6只)或106孢子／ml(106孢 子／ml组，6只)真菌混悬液的滤纸贴敷于去上皮的角膜基质并用角膜接触镜覆盖，将浸有生理盐水的滤纸贴 敷于另6只兔眼角膜作为对照组。分别于造模后3、7、14 d裂隙灯下观察眼前节症状，参照Dong的标准进行 症状评分。制备角膜刮片并用质量分数10％KOH和荧光白染色在荧光显微镜下检测真菌菌丝，角膜组织切 片分别行苏木精一伊红和过碘酸希夫染色，光学显微镜下观察角膜形态学改变和菌丝生长情况。对感染组织 进行真菌培养以验证模型的质量。结果108孢子／ml组和106孢子／ml组真菌性角膜炎模型成功者分别为 6眼和4眼，裂隙灯检查表明造模3d后108孢子／ml组眼前节症状明显重于106孢子／ml组，且随着时间的延 长，炎性损伤逐渐转向增生期。造模后3d和7d，2组感染的兔眼症状评分明显高于对照组，差异均有统计学 意义(PO．01)，108孢子／ml组兔眼的症状评分均明显高于106孢子／ml组，差异有统计学意义(PO．01)，造 模后14d，108孢子／ml组兔眼的症状评分明显高于对照组，差异有统计学意义(P0．05)。造模后3d和7d，2 组兔眼角膜刮片中均可见真菌菌丝。角膜组织病理学检查显示，造模3d和7d后108孢子／ml组可见炎性细 胞浸润和角膜基质细胞坏死，并可见真菌菌丝，造模后14d可见新生血管长入。106孢子／ml组炎症轻于103 孢子／ml组。真菌培养结果表明，造模后3d和7d时105孢子／ml组均见菌丝生长，而106孢子／ml组仅在造 模3d时可见菌丝生长。结论改良角膜表面镜片术法可成功制备兔曲霉菌性角膜炎动物模型，是一种简 便、易于操作的真菌性角膜炎动物模型制作方法。 【关键词】 曲霉菌；真菌性角膜炎；动物模型；角膜表面镜 中图分类号R772．21 Rabbit inducedmodifiedcorneal lensmethod modelof keratitis surface aspergillus by uU Li-xin．State Cultivation Provincial T讯g，XUYuan—yuan．CHENHao，XIE KeyLaboratory Base，ShandongKey 266071，China Laboratoryofophthalmology，ShandongEyeInstitute，Qingdao author：XIE CorrespondingLi-xin，Email：lixinxie@public．qd．sd．cn Animalmodelof keratitisisanavailabletooltothe of 【Abstract】Background fungal experimentalstudy the mechanismof keratitis．Current of keratitisincludecorneal methods pathogenesis fungal modeling