第五单元 基因重组方法=全.pptVIP

自然转化过程的特点： a）对核酸酶敏感； c）转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化（DNA） 给体菌株和转化受体菌株之间的亲源关系； d）通常情况下质粒的自然转化效率要低得多； 提高质粒的自然转化效率的二种方法： 1）使质粒形成多聚体，这样进入细胞后重新组合成有 活性的质粒的几率大大提高； 2）在质粒上插入受体菌染色体的部分片段，或将质粒转 化进含有与该质粒具有同源区段的质粒的受体菌-------重组获救 b）不需要活的DNA给体细胞； 噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒 转染(transfection)： 现在把DNA转移至动物细胞的过程也称转染 提纯的噬菌体DNA以转化的（而非感染）途径进入细胞 并表达后产生完整的病毒颗粒。 特点： 接合 (conjugation)： 细胞与细胞的直接接触（由F因子介导） 转导(transduction)： 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transformation)： 游离DNA分子 + 感受态细胞 “接合” “转导” 及“自然转化”这三种在自然界中 存在的细菌遗传重组过程各自的特点： a）外源DNA的来源及进入途径有差异； b）决定因素也各有不同； (2)人工转化 用CaCl2处理细胞，电穿孔等是常用的人工转化手段。 在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组