结直肠癌奥沙利铂耐药相关蛋白的筛选与鉴定.pdfVIP

肿瘤2013 年3 月第33 卷第3 期　TUM OR Vol. 33, March 2013　　 223 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.03.003 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 结直肠癌奥沙利铂耐药相关蛋 白的筛选与鉴定 1 1 1 1 1 1 1 2 宗明珠 ，冯婉婷 ，杜　楠 ，叶丽霖 ，陶善东，付宪华 ，何敬东，周建伟 1. 南京医科大学附属淮安第一医院肿瘤内科，江苏淮安　223300 ；2 . 南京医科大学肿瘤中心，江苏南京　2 10029 [ 摘要 ]　目的：采用蛋白质组学技术筛选结直肠癌 （colorectal cancer ，CRC ）中对化疗药物奥沙利铂 （oxaliplatin ， L-OHP ）耐药的相关蛋白，以期为CRC 的个体化治疗提供生物标志物。方法：建立L-OHP 耐药细胞株HT-29/ L-OHP ，提取细胞总蛋白，采用二维凝胶电泳 （two-dimensional gel electrophoresis ，2-DE ）和基质辅助激光解吸 电离- 飞行时间质谱 （matrix assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry ，MALDI- TOF-MS ）筛选并鉴定与亲本HT-29 细胞差异表达的蛋白，并应用蛋白质印迹法对鉴定获得的部分蛋白进行验证。 结果：建立CRC 亲本细胞株HT-29 和L-OHP 耐药细胞株HT-29/L-OHP 蛋白的2-DE 图谱，共获得表达差异 2 倍以上的蛋白质点38 个，经MALDI-TOF-MS 分析，有37 个得到鉴定，与亲本细胞相比，表达上调的有17 个， 表达下调的20 个；蛋白质印迹法检测结果显示，多聚胞嘧啶结合蛋白1[poly （C ）-binding protein-1，PCBP1] 和 TUBB2A （tubulin beta-2A ）蛋白在HT-29/L-OHP 细胞中表达上调，膜联蛋白A3 （annexin A3，ANXA3 ）和磷酸 化应激诱导蛋白（stress-induced-phosphoprotein 1，STIP1）表达下调，与MALDI-TOF-MS 的实验结果相一致。结论： 筛选获得37 个与CRC 对L-OHP 耐药的相关蛋白，为进一步研究CRC 对L-OHP 耐药机制提供了有力的实验依据。 [ 关键词 ]　结直肠肿瘤；抗药性，肿瘤；电泳，凝胶，双向；质谱分析法；奥沙利铂；HT-29 细胞 [中图分类号]　R735.34 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 03-0223-06 Screening and identifying oxaliplatin-resistance-associated proteins in colorectal cancer cell lines 1 1 1 1 1 1 1 ZONG Ming-zhu , FENG Wan-ting , DU Nan , YE Li-lin , TAO Shan-dong , FU Xian-hua , HE Jing-dong , ZHOU Jian-wei 2 1. Department of Medical Oncology，Huai’an First People’s Hospital, Nanjing Medical Univ