微波辅助水解和衍生在测定天然药物中氨基酸和单糖的应用.pdf

提 要 本文应用微波辅助水解衍生研究了中草药中的氨基酸和单糖，建立了应用毛细 管区带电泳测定以上两类化合物的方法，并用于实际样品分析。 采用微波水解和衍生，以 2,4-二硝基氟苯为衍生剂并用毛细管电泳法测定了 三七中的 11 种氨基酸，缩短了分析时间，简化了水解衍生的过程，优化了微波辅 助水解衍生和毛细管电泳测定条件，建立一种快速简便测定三七中氨基酸的方法。 利用微波辅助水解衍生，利用胶束毛细管电泳法测定了柴胡口服液中 18 种氨 基酸，与传统的区带电泳法相比，可同时分离检测的氨基酸增多，提高了方法的实 用性。 采用微波辅助水解衍生和区带毛细管电泳，以 1-萘胺为衍生剂测定了升麻多 糖中7种单糖，简化了传统测定中应用内标测定糖类含量的方法，使整个分析过程 更加快速。 以 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮为衍生剂，以毛细管区带电泳为检测方法，应 用微波辅助水解衍生取代传统方法，测定了雷公藤多糖中6种单糖。与其他方法比， 测定的线性范围宽，更有利于实际样品分析。 摘 要 作 者：李晓甜 指导教师：于爱民教授 专 业：分析化学 微波化学是一门新兴的交叉学科，最早出现于 20 世纪六十年代，我国于八十 年代开始开展相关研究。因为微波辅助可使化学过程或反应效率提高，极大缩短 了前处理或者反应时间，因而被广泛地应用于化学的各个领域。微波辅助水解和 衍生是反应物中的极性分子或者离子与周围相邻分子在微波照射下吸收能量转 动摩擦，对反应物进行水解和衍生的技术。高效毛细管电泳 (HPCE) 是八十年 代以来蓬勃发展的分离检测技术，与其他分离检测技术相比具有分析速度快、污 染小、进样量少、成本低的优点，被广泛应用于环境、生物、化工、化学、医学 等领域。本文选择用 HPCE 分离检测经微波辅助水解衍生后中药中的氨基酸与单 糖，并建立这些化合物水解、衍生和检测的方法。 本文绪论主要包括三方面内容，一，简要介绍了微波技术在化学各方面的应 用，二，对微波技术在水解衍生中的应用进行了评述，三，简要地叙述了毛细管 电泳的发展和应用。 第二章，微波水解衍生与毛细管电泳联用分离测定了三七中11种氨基酸，在 消解罐中加入0.2000 g三七粉末和10 mL含有1 %苯酚的6 mol/L HCl 。通入氮气， 在170 ºC、20 min下水解, 减压蒸馏后用10 mL 0.5 mol/L HCl回溶，以2,4-二硝基 氟苯为衍生剂，在微波功率260 W ，30 s条件下衍生，应用区带毛细管电泳分析。 选择了水解和衍生的最佳条件和毛细管电泳分离的条件，如分离电压、背景电解 质的pH值和背景电解质中硼砂浓度，在选定的条件下，11种氨基酸得到了分离， 分析了实际样品，与传统方法进行了比较，由水热和衍生法得到的结果与用本法 得到的结果基本一致。但用本法时，时间大大缩短了。 第三章，以胶束毛细管电泳法为分离检测方法，检测波长为254 nm，研究了 柴胡中氨基酸组分，以4-氯-3,5-二硝基三氟甲苯（CNBF ）为衍生剂。1-丁基-3- I 甲基四氟咪唑硼酸盐和十二烷基硫酸钠作为电泳背景电解质的主要成分，并 形成胶束。研究并确定了水解和衍生的最佳条件以及毛细管电泳分析的最佳 条件。在选定的条件下，18种氨基酸得到了分离，并得到了满意的样品分析 结果。 第四章，研究了升麻中多糖的单糖组分，运用微波辅助水解衍生，用毛细管 电泳法测定了升麻中7种单糖。在消解罐中通入氮气，加入20 mg升麻样品，加入 2 mol/L 的三氟乙酸10 mL , 进行微波水解，之后旋蒸回溶，以1-萘胺为衍生剂， 在260 W微波功率下，经过70 s衍生后用毛细管电泳分离检测，检测波长为214 nm ，在18 kV，pH 10.5 ，硼砂浓度75 mmol 的条件下，分析了一些实际样品。在 选定条件下，7种单糖的检出限为0.42-1.36 μg ·mL-1 ，并