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效价测定
试验原理
试 剂
操作步骤
注意事项
临床应用;一、试验原理;二、试剂;三、操作步骤; 3、第1排第1管加2-Me处理血清0.4ml,混合,吸出0.6ml,移0.2ml至第2排第1管内,其余0.4ml移入第1排第2管内,混合。以此类推,作倍量稀释至第10管, 每管内留有 1∶4, … 1:2048等不同稀释度的血清各0.2ml。; 4、第1排每管各加5%A型红细胞悬液0.2ml,第2排每管各加5%B型红细胞悬液0.2ml,置37℃水浴温育1h。
5、结果观察:如在前几管内发现有红细胞凝集者,是由于高效价IgG抗A(B)或IgA抗A(B)所引起,称为“盐水效价”。; 6、其余红细胞未见凝集的试管,再以生理盐水洗涤3次,除去洗涤液,留取压实红细胞。
7、每管各加生理盐水 2滴,混合。
8、每管各取1滴,分别移至另一排小试管中,再各加抗人球蛋白血清1滴,混合。; 9、1000rpm离心1min。
10、轻轻摇动试管,观察结果,红细胞凝集的最高稀释度的??数即为IgG抗A或抗B效价。;四、注意事项;也可使用二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)灭活IgM抗体,以测定IgG抗体。DTT无恶臭味,反应快速,但对强抗体灭活效果较差。;五、临床应用
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