Objective to investigate the value of maturation of human immature oocytes in vitro探讨人未成熟卵母细胞体外培养成熟的价值.pdfVIP

摘 要 目的: 研究来源于常规超排卵周期体外受精-胚胎移植或卵胞浆内单精子注射 （IVF/ICSI-ET ）的未成熟卵母细胞，观察其在商品化IVM 培养液中以及人输卵 管液（HTF ）中体外培养成熟、受精、胚胎发育及囊胚形成能力，探讨人未成熟 卵母细胞在体外成熟后的应用价值。 方法: 选择在我中心行常规超排卵周期IVF/ICSI-ET 助孕的58 例患者，将周期中 获得的未成熟卵母细胞按照不同培养液培养（IVM 培养液和 HTF 培养液），不 同开始培养时间（取卵后4h.10h.24h ），不同生长阶段（GV 期和MI 期），不同 成熟来源（体内和体外）等分组。将未成熟卵母细胞进行体外成熟培养，成熟 卵子行ICSI 授精后进行胚胎培养，第三天选择 1,2 级胚胎进行囊胚培养。比较 分析上述分组的卵母细胞成熟率，受精率，卵裂率和1,2 级胚胎率等情况。 结果: 1.两组培养液中，IVM 组成熟率，受精率，卵裂率，1,2 级胚胎率均高于HTF 组，受精率差异有统计学意义（68.57%和36.73%，P ＜0.05 ）。 2.两组培养液中开始培养的时间D24h 组与D4h 组相比，成熟率，受精率， 卵裂率均差于 D4h 组，受精率（P ＜0.05 ）均有统计学意义。两种液体中D10h 与D4h 相比，成熟率，受精率，卵裂率虽较D4h 组差，统计学是无差异的。 3.IVM 培养液中，MI 期卵母细胞的成熟率，受精率，卵裂率均高于GV 期 卵母细胞，成熟率（80.36%和55.55%，P ＜0.01 ）和卵裂率（71.11%和64%， P ＜0.05 ）差异有统计学意义。在HTF 培养液中，MI 期卵母细胞的成熟率，受 精率，卵裂率均高于 GV 期，其中成熟率（68.89%和43.9% ，P ＜0.01 ）和受精 率（41.93%和27.77% ，P ＜0.05 ）差异有统计学意义。 4.体外的IVM 组和HTF 组与同源体内组相比，卵裂率（77.08%，72.22%， 92.71. P ＜0.05 ），1,2 级胚胎率（59.45%，30.76%,79.84%.P ＜0.05 ）均低于同源 II 体内组，统计学差异具有显著性。HTF 组与同源体内组相比受精率（36.73%和 65.92%，P ＜0.05 ）差异有统计学意义。 5.187 个未成熟卵母细胞经体外培养成熟后得到的26 个1,2 级胚胎进行囊胚 培养共形成5 个囊胚。 结论: 1.控制性超排卵周期中获得的未成熟卵母细胞能够在体外发育成熟并形成 正常受精的胚胎。 2.未成熟卵母细胞在IVM 培养液比在HTF 培养液中培养更有利于卵母细胞 的发育。 3.IVM 开始培养的时间可以选在取卵后10h 内进行。 4.正常超排卵周期获得的MI 期的卵母细胞体外培养比GV 期的卵母细胞体 外培养更容易成熟且得到质量较好的胚胎。 5.未成熟卵母细胞经体外培养成熟后仍有形成囊胚的潜能。 关键词: 未成熟卵母细胞；体外培养；卵胞浆内单精子显微注射 囊胚 III ABSTRACT Objective : To investigate the rate of maturation, fertilization and developmental compet- ence of immature oocytes abandoned after in vitro fertilization /intracytopl- asmic sperm injection embryo transfer cycles in the commercialization of in vitro maturation culture medium and human tubal fluid(HTF) culture medium by in vitro maturation (IVM)culture