苹果酸的生产现状和研究进展.docx

2013’中国生物发酵产业年会苹果酸的生产现状和研究进展刘元涛刘超薄文文山东阜丰发酵有限公司山东省氨基酸发酵重点实验室山东省氨基酸工程研究中心阜丰集团博士后工作站内蒙古阜丰国家企业技术中心阜丰集团公司【摘要】苹果酸是具有重要功能的有机酸，在食品、医药和化工领域都有广泛的用途。 本文简述了L一苹果酸和DL一苹果酸的生产和提取方法，并预测了苹果酸的下一步研究方向。【关键字】苹果酸生产现状研究进展ProductionStatllsofMaHcAcidandItsResearchProgress【Abs仃act】MalicaCidisano玛anicacid，whiChis、Ⅳidelyusedinfood，medicineaIldchemicalindus缸ywithitsimport锄t胁ctions．T11is p印ergiVesa晡efin们duceonproductionande)【仃ationmethodsofL-malicacidandDL—II】lalicacid．Besides，itbrienydiscussesthemnlrerese锄．chdirectionsofmalicacid．【Keywords】Malicacid，Productionstatlls，Researchprogress1．绪论苹果酸是具有旋光性的有机酸，L．苹果酸是三羧酸循环的代谢中间体，DL．苹果酸 是一些有机化合物的原材料。1928年就有报道称培养黄曲霉的时候会有少量的苹果酸生成【l】。日本对苹果酸的研 究比较深入，从1959年开始从未中断过研究发酵法生成L一苹果酸，取得了一些突破。 我国也有较多科研机构和高校对发酵生产苹果酸进行研究，80年底末期山西生物研究所 曾经在南通发酵厂中试过使用无根根霉菌和普通变形杆菌生产L．苹果酸，但发酵时间过长、产酸率较低和成本较高导致项目扩大化的流产【21。日本是L．苹果酸的主要生产国和出口国，年产量占世界总产量的一半以上，我国的年产量也超过l万吨。美国是苹果酸的消费大国，虽然年产量超过8000吨，仍要从日本进口相当数量的苹果酸满足国内市场需求。DL．苹果酸的生产一般使用化学合成法，美国从1963年开始工业化生产，1965年 年产量已经超过2000吨。DL．苹果酸的主要用途分为食用和非食用两个方面，应用在医118第二部分有机酸篇药方面时，国外标准要求的纯度较高，因此在工业生产中其精制过程存在一定难度【3】。 我国曾经在东北制药总厂生产DL．苹果酸，但由于催化反应的反应釜需要每年更换，试制三年后停产。L．苹果酸和DL．苹果酸都可以应用在食品工业中作为酸味剂，两种苹果酸在外观和 味道上并无太大差别，但DL．苹果酸使用化学合成法，工艺设备投入大，需要高温、高压和催化剂，设备腐蚀较严重增高了折旧费用；而L一苹果酸主要依靠发酵法生产，生产条件温和、对环境污染较小。苹果酸作为食品酸化剂的市场价值约1．6亿美元，市场需求量约7万吨，L．苹果酸在未来食品行业酸味剂中所占比重必然逐渐升高。2．苹果酸的生产苹果酸的生产主要有化学合成法、微生物法和固定化法，其中化学合成法用于生产 DL一苹果酸，后两种方法用于生产L．苹果酸。2．1化学合成法生产DL一苹果酸 高温高压水合法是制造DL．苹果酸最主要的工业技术，其步骤是以顺丁烯二酸为原料，加热至120℃，在1MPa的压力下进行水合作用生成DL一苹果酸，DL．苹果酸随着浓度增高会脱水生产反丁烯二酸，反丁烯二酸也可缓慢水合生产DL．苹果酸，最后形成反丁烯二酸与苹果酸的可逆平衡，其中苹果酸占63％【41。最开始生产苹果酸是使用富马酸和马来酸的混合物作为原料进行高温高压水合反 应，生成苹果酸和富马酸的混合物，再通过结晶的方法制得DL．苹果酸，但马来酸腐蚀性较强，设备的折旧费较高。同时美国规定食品级DL．苹果酸中富马酸的含量要小于O．5％，实际过程中很难将富马酸从混合物中去除，造成DL．苹果酸的纯化成本较高。2．2微生物发酵生产L一苹果酸 L一苹果酸是生物体中三羧酸循环和乙醛酸循环的中间体，利用微生物发酵生产L．苹果酸较常用的有三种方法，第一种是用糖类为原料，使用霉菌(黄曲霉、米曲霉或寄 生曲霉)直接发酵生产L．苹果酸；第二种是两步发酵法，先用根霉菌(无根霉、华根霉 或黑根霉)将糖类发酵成富马酸，再由酵母(毕赤酵母、假丝酵母和汉逊酵母)将富马酸转化为L．苹果酸【5】；第三种是酶转化法，直接以富马酸盐为原料，利用微生物的延胡索酸酶转化为苹果酸。最常使用的L．苹果酸直接发酵菌是黄曲霉菌，可以直接分解淀粉用于发酵。发酵的 碳源可以使用脱脂玉米粉、葡萄糖、液化淀粉和淀粉水解液，其中淀粉水解液转化率最 高。氮源可以使用硫酸铵、硝酸铵和尿素，其中硫酸铵的产酸率最高。研究发现磷酸盐 对黄曲霉产酸的影响较