第13章毛细管电泳.ppt

第13章 毛细管电泳法 第13章 毛细管电泳法 一、概述 generalization 二、经典电泳法 traditional electrophoresis 三、毛细管电泳法 capillary electrophoresis 第1节 概述 generalization GC： 只适用于热稳定性好、易挥发的物质。 HPLC：缺乏高灵敏的通用型检测器（与GC相 比）； 实验中需消耗大量的有机溶剂； 特别是对于大分子物质因其分子扩散系 数小、传质阻力大，使柱效大大降低， 以至于难于分离分子量大于2000的物质。 毛细管电泳与色谱 第13章毛细管电泳法 一、电泳和电泳淌度 electrophoresis and mobility 二、电渗与电渗率 electroosmosis and electroosmotic mobility 三、表观淌度和权均淌度 apparent mobility 四、分离效率和分离度 separation efficiencyand Resolution 第2节 基本原理 当带电粒子以速度u在电场中移动时，所受的电场力为 FE = q E 式中FE ——电场力；q——溶质粒子所带的有效电荷； E——电场强度。 带电粒子运动时所受的阻力，即为摩擦力， F f = f uep 式中F f ——摩擦力； f ——摩擦系数； uep——溶质粒子在电场中的迁移速度。 当平衡时，电场力和摩擦力相等而方向相反，q E = f uep 则 uep = qE/f f 的大小和带电粒子的大小、形状以及介质粘度有关。 对于球形粒子， ；对于棒状粒子， 其中 是离子半径； 是液体介质的粘度。 所以 或 q/r 越大，即体积越小，电荷越高的粒子uep越高，迁移越快；q/r 越小，即体积越大，电荷越低的粒子uep越低，迁移越慢； 不同物质在同一电场中，由于它们的有效电荷、形状、 大小的差异，因它们电泳迁移速度的不同，而实现分离。 3.有效淌度 二、电渗和电渗流 electroosmosis and electroosmotic mobility 2. 电渗流（ electroosmotic flow，EOF ） 3. 电渗流的速度与方向 电渗流的方向 4. 电渗流的流形 5. 电渗流的作用 三 表观淌度和权均淌度 式中μp为P相的表观淌度，k p为容量因子 四、分离效率和分离度 （二）.分离度 第13章毛细管电泳法 一、毛细管电泳仪 capillary electrophoresis apparatus 二、流程与主要部件 process and main assembly 三、进样方式 injection method 高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus 仪器2 仪器3 主要部件（main assembly）  一.高压电源 三、进样系统 injection method of HPCE 1. 电动力学进样法 第13章毛细管电泳法 一、毛细管区带电泳(CZE) capillary zone electrophoresis 二、胶束电动毛细管色谱(MECK) micellar electrokinetic chromatography 三、毛细管凝胶电泳(CGE) capillary gel electrophoresis 四、毛细管电色谱(CEC) capillary electrochromatography 五、非水毛细管电泳(NAGE) non-aqueous capillary electrophoresis 分离模式 一、毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis ，CZE 操作条件的选择 （1） 缓冲液的种类 （2）缓冲液的pH值 药物分析analysis of pharmaceutics 应用实例1.CZE测定葛根及其制剂正心