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胡凯 讲义版
畸形精子的意义 上海男科学研究所 胡凯 精子的形态分析学 精子形态的介绍(结构上) 形态分析的临床意义(重要性) 染色的方法、不同方法的比较、注意事项 形态分析在WHO-4,WHO-5判断的更新 结果可能的临床意义 精子的形态结构 头部 体部 尾部 始于20世纪初,当时已公认在一份精液样本中可同时出现正常的和病态的精子 精子形态作为评估男性生育潜能的工具 辅助生殖预测 异常精液标本制备 密度 2 × 106/ml 1. 标本的离心浓缩( 600g for 10 minutes ) 2. 弃去上清液,调至适当的密度(50 × 106/ml) 3. 按照正常精液标本制备涂片 粘稠的标本 促进液化 洗涤 精子形态染色方法 1、改良巴氏染色法 2、 Diff-Quick法 3、 shorr染色 颜色均匀,不产生细胞大小改变 易于区分精子各个部分 形态观察的顺序 形态分析的判定方法 精子形态评估的历史包括两种方法 (1)自由的方法 (2)严格的方法 自由的方法 所有认为不是异常的精子认为就是正常的,因此将一些因疏忽未发现的异常形态精子误认为是形态正常精子。 正常精子以及特殊的异常精子经常用一些图解和不准确的绘图描述。 理论上,可以预期正常精子功能和生育率的相关性很差。 严格的方法 在20 世纪70 年代末到80 年代初形成概念,Menkveld 等在1987 年和1990 年对此进行了描述。 正常精子的定义依据的是从子宫颈口内部的精子得到的生物学证据。 严格的方法 第3 版手册对人类精子形态学分类方案进行了仔细描述。手册中指出,“严格标准应该在评估精子形态正常时使用。”并给出形态正常精子严格评估的定义,同时还指出,应该认为“临界的”形式均是异常的 第4 版手册完全采用了严格方法。 可能导致参考值下降的原因 (1)实施严格的评估标准导致的低结果是对正常形态精子的评估过于严格 (2)过去几年中对精子形态异常使用了很多的标准,并引入到评估系统 (3)因为环境因素的负面影响导致真正的下降。 (4)评判的对象改变 形态临床意义分类 根据形态模式和形态异常分为两组或预测类别: 第1 组使妻子妊娠的能力较差,因包括许多遗传性的精子形态缺陷,如圆头精子症;短尾症;小头精子,大多数情况下是非常小的顶体,而在大头精子的病例中,许多是很大的顶体;大的或小的顶体单独存在。所有这些类型的异常精子与精子功能异常相关,因此在体内和人工授精时成功率很低。 第2 组包括一些由环境因素(包括药物治疗) 造成的非特异的或非遗传性的精子缺陷或模式。 一、遗传性决定的精子缺陷 圆头精子症 最有名的遗传性决定精子致命缺陷或模式的是圆头精子症。这些精子以小而圆的头及顶体缺失而很容易识别。由于缺少顶体,精子头部缺乏顶体酶,无法结合和穿透透明带。如果夫妇采用胞浆内单精子注射(ICSI)治疗,在某些情况下可以妊娠 短尾症 这种精子缺陷是由于精子星状体形成,配子配合和分裂的缺陷造成的。即使用这些经过精心挑选的异常精子行ICSI,且妊娠后人绒毛膜促性腺激素茁亚单位(β鄄hCG)水平呈阳性,也很容易流产 小头精子 即使有小顶体的大精子存在,顶体未达到精子正常头部大小的30%,IVF的结果也很差,因为精子的活力低,不能进行顶体反应。 大头精子 ICSI 得到的受精率和妊娠率都很低,其原因可能是射出的巨大头部精子染色体畸变的发生率很高。 二、非遗传性精子形态异常 巨大头部 药物、染色等因素(柳氮磺胺吡啶)。药物因素引起巨大头部在停药以后,巨大头部的精子会消失。 狭长的精子 精子的狭长是普遍公认的由压力诱导的精子形态异常 在曲张精索静脉切除的病例中,没有观察到精液质量得到明显的改善,但是仍然能够妊娠,这是因为由于曲张精索静脉切除术后活性氧(ROS)产量的减少使精子DNA的质量得到改善。 细胞质残留物 细胞质残留物的存在与精子的不成熟特别是ROS的产生有关,进而导致精子DNA 损伤;虽然可实施IVF,但据报道妊娠率会降低。因此,应该在精子形态常规评估中更加重视细胞质残留物。 精液白细胞分析 精液圆形细胞: 精液白细胞 精液生精细胞 精液圆形细胞? 精液或前列腺液中的圆形细胞一般为生精细胞和白细胞,在少弱精症或非梗阻性无精症的精液中常常会有生精细胞出现或在伴有生殖道感染的精液中会出现大量的白细胞,二者在镜检时单靠形态学难以区分,即使在高倍显微镜下也容易混淆。 通过特殊的白细胞染色方法,在很短的时间里区分出白细胞和生精细胞,快速准确,即使在普通显微镜下也能准确分
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