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分光光度法简介
分光光度法 基本原理 光又是一种电磁波,其传播呈波动性质,具有波长和频率的特征。 γ射线 X射线 紫外线 可见光 红外线 无线电波 人肉眼可见的电磁波称可见光,波长范围在400-760nm。 200-400nm为紫外光区,760-500000nm为红外光区 可见光区的电磁波,因波长的不同而呈现不同的颜色,称为单色光 单色光并非单一波长的光,而是一定波长范围的混合光 一切物质都会对某些波长的光进行吸收,不同物质对不同波长的光表现为不同的吸收现象 物质的吸收光谱与它们自身的分子结构有关,不同的物质由于其分子结构的不同,对不同波长光线的吸收能力也不同 在一定条件下,其吸收程度与该物质的浓度成正比 分光光度法 利用分光光度计测量不同浓度溶液对同一波长光的吸光度 通过比较溶液的吸光度来比较它们的浓度 比色法 分光光度计的结构 光源 单色器 吸收池 感光器 测量器 (待测溶液) 光源 发光强度高、光谱范围较宽、稳定和使用寿命长 钨灯和氢灯(或氘灯) 单色器 将混合光波分解为单一波长光 多用棱镜或光栅 根据需要选择一定波长范围的单色光 狭缝 一对隔板在光通路上形成的缝隙 通过调节缝隙的大小调节入射单色光的强度 吸收池 比色杯、比色皿或比色池 可见光范围内测量时选用光学玻璃比色皿 在紫外线范围内测量时必须用石英比色皿 感光器 光电池、真空光电管或光电倍增管 将接收到的光能转变为电能,并应用高灵敏度放大装置,将弱电流放大 测量器 测量感光器所产生的电能,由电流计显示出电流的大小 在仪表上可直接读出待测溶液的吸光度值 * *
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