Preparation of norcantharidin loaded -N chitosan silk fibroin microspheres and its antitumor effect去甲斑蝥素-N乳糖酰壳聚糖丝素蛋白微球的制备及其抗肿瘤作用的实验研究.pdfVIP

去甲斑蝥素-N 乳糖酰壳聚糖/丝素蛋白微球的 制备及其抗肿瘤作用的实验研究 中文摘要 目的：制备去甲斑蝥素-N-乳糖酰壳聚糖/丝素蛋白微球(Norcantharidin-N-chitosan- silk fibroin-microspheres, NCTD-N-CS/SF-MS)，观察其表征及其对兔VX2 肝移植瘤的 化疗栓塞术后抑瘤作用。 方 法： （1）采用乳化- 固化法，制备去甲斑蝥素-N-乳糖酰壳聚糖/丝素蛋白微 球(NCTD-N-CS/SF-MS) ，光学显微镜观察及测量微球的粒径大小及分布，扫描电镜 观察微球的表面形态，采用红外光谱法（FT-IR ）验证微球的构成，并对微球的载药 量、包封率、悬浮性及导管推注实验进行考察。采用体外动态透析法在 pH7.4 磷酸盐 缓冲液释放介质中测定其溶胀性及释药性能。（2 ）40 只新西兰大白兔经超声引导下 于肝脏左叶植入 VX2 肿瘤组织块，建立肝移植瘤模型，超声监测肿瘤生长，并用影 像学手段及病理表现评估建模是否成功。 （3 ）取建模成功的动物30 只并随机分为 5 组，每组 6 只，股动脉穿刺插管后经肝动脉分别给予 NCTD-N-CS/SF-MS （A 组）； 空白微球 N-CS/SF-MS （B 组）；N-CS/SF-MS ＋NCTD 溶液（C 组）；碘化油+ NCTD 溶液（D 组）；生理盐水（E 组）。经治疗后，观察各组兔血常规及肝、肾功能和肝 肿瘤体积的动态变化以及病理表现，术后 30 天 CT 及肝动脉造影评价治疗效果，并 记录动物生存时间，计算生命延长率。 结 果：（1）所制去甲斑蝥素-N 乳糖酰壳聚糖/丝素蛋白微球在光镜及扫描电镜 下均显示外观圆整，表面光滑，平均粒径 117±4.3μm ，载药量平均值为(15.08±2.85)%、 包封率为(27.46±1.25)%，能够在PH7.4 的磷酸缓冲液中快速溶胀，70min 基本溶胀完 全，体外释药缓慢平稳，7 天的累积释放率为 60% 。（2 ）利用超声引导穿刺针种植 操作方便，模型稳定，建模成功率 87.5%。（3 ）各组动物血细胞数量及血红蛋白值 均有不同程度下降，A 、B 、C 组动物术后平均白细胞数量（中性粒细胞为主）增多， 各治疗组动物肝功能均出现一过性损害；A 组较余各组作用更强，抑瘤率高达 85.01%， I 具有统计学意义（P ＜0.05 ），肿瘤体积远小于其他各组，病理切片示肿瘤大片凝固 性坏死，肿瘤坏死率达 56.78%，高于 B 组的 49.63%及 C 组 52.23% 。术后 30 天 CT 示 A 组肿瘤体积明显小于其他各组，肿瘤内部坏死明显，肝动脉造影示栓塞彻底， 仅少量侧支血管形成。A 组平均生存时间最长，达到 36.25 天，生命延长率达 54.25% 。 结 论：NCTD-N-CS/SF-MS 制备工艺简单易行，能明显抑制肿瘤生长，并造成 肿瘤明显坏死(P＜0.05) 。 关键词：去甲斑蝥素；壳聚糖；丝素蛋白；原发性肝癌；肝靶向 作 者：文庆怡 指导教师：靳 勇 副教授 II Preparation of Norcantharidin-N-chitosan/silk fibroin-microspheres and Its Tumor Inhibitory Effect Abstract Objective:To prepare Norcantharidin-N-chitosan/silk fibroin-microspheres (NCTD-N-CS/SF-MS)and to investigate their characterization and efficacy from hepatic emb