广西莪术DNA提取方法的研究.pdfVIP

转化医学电子杂志 (E—JTranslNed)2014，1(2) · 药学与转化医学 · 文章编号：2095-6894(2014)02-069-03 广西莪术 DNA提取方法的研究 黄凤香，曾建红，刘青波 (桂林医学院，广西桂林541000) Extraction method of genomic DNA from 高质量的基因组DNA是开展种质资源鉴定和遗 Curcumakzoangsiensis 传多样性研究等分子生物学研究的基础．目前随着 HUANGFeng—Xiang，ZENGJian-Hong，LIUQing—Bo 广西莪术生物技术研究的开展，建立高质量的基因组 GuilinMedicalCollege，Guilin541002，China DNA的快速高效提取方法非常重要．近年来，尽管已 有很多关于植物基因组 DNA提取的报道，然而关于 A【bstract】AIM：Theextractionofhighquali~genomicDNAis 广西莪术基因组 DNA提取方法的报道至今未见到． fillimportantofundation forthebiotechnologyresearch ofcurcu- 本研究采用三种不 同方法提取广西莪术基 因组 ma．METHODS：Th isresearchusedthemodifiedCTAB meth． DNA，并进行比较分析，旨在建立和完善一种高质量 od，SDSmethodandreagentkitsrespectively，toextractleavesof 广西莪术基因组 DNA的提取方法，为广西莪术分子 genomicDNA from GuangxiCurcuma．Th equalitywerevalidated byDNA elecrtophoresis，nucleic acid protein contentdetection 生物学研究提供技术参考． nadPCR．RESULTS：Th eresultsshow thatthemodifiedCn B methodcanobtainhighpurity，lessimpuritygenomicDNA，and 1 材料和方法 PCR amplification．CONCLUSION ：Th emodifiedCTABmethod 1．1 材料 试验材料取 自广西莪术的新鲜嫩叶，使 isahighlyeffectivemehtodofrextractingDNA from Cureuma． 用蒸馏水清洗干净后晾干，置于一80℃冰箱中保存备 【Keywords】Curcumakzoangsiensis；genomicDNA；modified 用． CTAB method 1．2 方法 本试验分别采用改 良CTAB法、改 良 SDS法和试剂盒提取广西莪术基因组DNA． 【摘 要】高质量的基因组DNA提取是进行广西莪术生物技 术研究的重要基础．本文采用改 良CTAB法、改 良SDS法和 1．2．1 改 良CTAB法 ①取0．05g的新鲜叶片置于 试剂盒分别提取广西莪术叶片的基因组 DNA，并进行 电泳和 研钵，加入液氮用研杵棒将叶片迅速磨成粉末，加入l 核酸蛋白含量检测以及PCR验证．结果表明改 良CTAB法提 mL预热的 20mL／LCTAB抽提缓冲液 (20mL／L 取广西莪术基因组 DNA样品的纯度高，杂质少 ，而且能有效 CTAB，1mol／L Tris—HC1pH =8．0，0．5mol／L EDTA 的进行PCR扩增．说明改 良CTAB法是一种高效的提取广西 pH=8．0，1．4mol／LNaC1，10mL／LPVP，10mL／LB一 莪术 DNA 的