构建抑制NFκB信号通路的药物筛选模型-新医学.PDF

第 １９卷第５期 激　光　生　物　学　报 Ｖｏｌ．１９Ｎｏ．５ 　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　 ２０１０年１０月 ＡＣＴＡ　ＬＡＳＥＲ　ＢＩＯＬＯＧＹ　ＳＩＮＩＣＡ Ｏｃｔ．２０１０ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００７７１４６．２０１０．０５．００３ 构建抑制ＮＦＢ信号通路的药物筛选模型 κ 张立鹏，李成海，刘明耀，罗　剑 （华东师范大学生命科学学院生命医学研究所，上海２００２４１） 摘　要： ＮＦＢ已被证明在肿瘤和炎症过程中起到至关重要的作用。因此，建立抑制 ＮＦＢ信号通路的药物 κ κ 筛选模型至关重要。利用荧光素酶报告基因技术与蛋白印迹技术分别探索ＴＮＦ 处理浓度及时间对 ＮＦＢ报 α κ 告基因表达和ＮＦＢ抑制亚单位ＩＢ 降解的影响，进而构建ＮＦＢ信号通路抑制剂药物筛选模型。实验结果 κ κα κ 表明，０．０１ｎｍｏｌ／ＬＴＮＦ 作用２４ｈ即能刺激ＨＥＫ２９３Ｔ细胞中ＮＦＢ报告基因较高水平的表达，且其表达量与 α κ ＴＮＦ 的剂量和处理时间呈正相关性；０．０１ｎｍｏｌ／ＬＴＮＦ 作用５ｍｉｎ即能使 Ｐａｎｃ２８细胞中ＩＢ 明显降解，２０ α α κα ｍｉｎ～３０ｍｉｎ几乎降解完全，之后ＩＢ 含量又开始增加。ＮＦＢ阳性抑制剂藤黄酸验证表明ＮＦＢ萤光素酶报 κα κ κ 告基因检测筛选体系和ＮＦＢ抑制亚单位降解筛选体系两种体系稳定可行。结果证明，两种模型可以用于ＮＦ κ κＢ信号通路抑制剂药物的筛选。 关键词： ＮＦＢ；药物筛选模型；ＴＮＦ；ＩＢ ；藤磺酸； κ α κα 中图分类号： Ｑ２９１；Ｒ９１５ 文献标识码： Ａ 文章编号： １００７７１４６（２０１０）０５０５８００７ ＤｒｕｇＳｃｒｅｅｎｉｎｇＭｏｄｅｌＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎＢａｓｅｄｏｎＩｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ＮＦＢＳｉｇｎａｌｉｎｇＰａｔｈｗａｙ κ ＺＨＡＮＧＬｉｐｅｎｇ，ＬＩＣｈｅｎｇｈａｉ，ＬＩＵＭｉｎｇｙａｏ，ＬＵＯＪｉａｎ （ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓａｎｄＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＥａｓｔＣｈｉｎａＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２００２４１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： ＮＦＢｉｓｋｎｏｗｎａｓａｍａｊｏｒｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｔｈａｔｐｌａｙｓａｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｉｎｆｌａｍｍａ κ ｔｉｏｎａｎｄｃａｎｃｅｒ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｉｔ’ｓａｐｒｏｍｉｓｉｎｇｓｔｒａｔｅｇｙｔｏｓ