结节性硬化症双生子中 TSC2基因突变的检测.pdfVIP

l16 JDiagnTherDermato—Venereol，Apr．2014．Vo1．211No．2 论 著 · 结节性硬化症双生子 中TSC2基因突变的检测 张向春 ， 田瑞东 ， 黄长征 ， 刘木根 ， 王秋芬 (1．华中科技大学生命科学与技术学院人类基因组研究中心，湖北 武汉 430074；2．华中科技大学同济医 学院附属协和医院皮肤科，湖北 武汉 430022；3．华中科技大学同济医学院附属协和医院综合科，湖北 武汉 430022) [摘要] 目的：对一对结节性硬化症双生子患者及其父母候选基因的突变进行检测，揭示该病的遗传 基础。方法：采用聚合酶链式反应，扩增结节性硬化症双生子患者TSC2基因的全部外显子，以及 内含 子外显子交接区，进行 DNA直接测序分析 ；利用 限制性片段长度多态性 (RFLP)技术检测 了患者 的父 母和500个健康人的突变，并分析本突变是否和结节性硬化症有关 。结果 ：双生子患者中均发现一个 TSC2基因的错义突变C．G2032A，该突变导致 TSC2蛋白678位的丙氨酸被替换为苏氨酸(P．A678T)； RFLP结果显示患者的父亲有 C．G2032A突变，500个正常人中有3人也携带此突变。结论 ：在结节性 硬化症人群中发现TSC2基因新的突变，这一发现丰富了该基因引起结节性硬化症的突变谱。 [关键词] 结节性硬化症 ；TSC2基 因；错义突变 [中图分类号] R593．2 [文献标识码] A DOI：10．3969／j．issn．1674—8468．2014．02．007 IdentificationofTSC2M utationin Twin Patientswi thTuberousSclerosisComplex ZHANGXiang—chun，TIANRui—d0 ，HUANGChang—zheng，LIUMu-gen，WANGQiu-fen (1．CollegeofLifeScienceandTechnology，CenterforHumanGenomeResearch，HuazhongUniver- sityofScienceandTechnology，Hubei430074，China；2．DermatologyDepartment，UnionHospi- tal，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Hubei430022，Chi— na；3．GeriatricsDepartment，UnionHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofSci— enceandTechnology，Hubei430022，China) Correspondingauthor：WANGQiu-fen，E—mail：qiufen_wang@hotmail．com [Abstract] Objective：Toidentifygenemutationsintwinpatientswithtuberoussclerosiscorn— plex(TSC)andtheirparents．Methods：Allthecodingregion，includingallexonsandexon—in— tronboundariesofTSC2wereamplifiedbypolymerasechainreaction。Theproductswereanalyzed bydirectDNA sequencing．Thegeneoftheirparentsand500unrelatedhealthyChineseindividuals wereanalysedbyRFLP(restrictionfragmentlengthpolymorphism)tosearchforthemutationand totestwhetherthemutation CO．segregateswith thedisease．Results：OnenucleotideG in2032 TSC2wassubstitutedbyA，whichcausedamissensemutation P．A678T in bothofthetwin pa— tie