甘薯块根总RNA的高效快速提取方法.pdfVIP

分子植物育种，2008年，第6卷，第 1期，第 193-196页 MolecularPlantBreeding,2008，Vo1．6，No．1，193—196 新思路、新技术、新方法 Novel ThinkingTechnology 甘薯块根总RNA的高效快速提取方法 杨元军 王玉萍 翟红 刘庆昌 中国农业大学植物遗传育种系，农业部作物基因组学与遗传改良重点开放实验室，北京市作物遗传改良重点实验室。教育部作物杂种优势研究 与利用重点实验室，北京，100094 通讯作者。liuqc@ella．edu．cn 摘 要 甘薯块根富含多糖(主要为淀粉)，提取RNA时，二者极易形成胶状沉淀而难以溶解，严重制约了甘 薯块根RNA的提取产量和质量，从而影响后续分子生物学的研究。本研究以甘薯新品系农大辐l4的块根 为材料，采用异硫氰酸胍提取液结合10％(w／v)醋酸钾(KOAc)和1％(w／v)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)沉 淀多糖，在1．5 h内完成块根总RNA的提取，平均产量为226／~g／gFW，A：√ 值为1．95。提取的总RNA可 成功进行单链eDNA的合成和反转录PCR。与已有相关报道相比，该方法在保证总RNA纯度的前提下，产 量有所提高，所用时间仅为前人报道的1／3-1／10。 关键词 甘薯(／pomo~口batatas(L．)Lam．)，K