临床生物化学检验重点.doc

第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱 教学目标与要求 掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；高尿酸血症和痛风的发生机制；血清总蛋白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。 熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；原发性和继发性氨基酸代谢紊乱的概念；含硫氨基酸检测的临床意义。 了解：苯丙酮酸尿症、酪氨酸血症、嘌呤核苷酸代谢紊乱。 血浆蛋白质及其代谢紊乱 蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45％，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。 血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前已有所了解的血浆蛋白质约有500种。 血浆蛋白的IEF/SDS电泳图谱 取一滴血浆在电泳板的左下角点样。 先在水平方向进行等电聚焦电泳（IEF），接着在垂直方向进行SDS。 血浆蛋白质的种类 盐析法:将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。 通过醋酸纤维膜电泳或琼脂糖凝胶电泳将血浆蛋白质分成清蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白等五个主要区带 。 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 （一）血清蛋白电泳的正常图谱 血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带。 血清蛋白电泳的正常组分 各条区带中多个蛋白质组分可有重叠、覆盖；两区带之间也有少量蛋白质；某些蛋白质组份染色很浅。 用醋酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值： 清蛋白（Alb）： 57％～68％、 35～52 g/L α1球蛋白： 1.0％～5.7％、 1.0～4.0 g/L α2球蛋白： 4.9％～11.2％、 4.0～8.0 g/L β球蛋白： 7％～13％、 5.0～10.0 g/L r 球蛋白： 9.8％～18.2％ 、 6.0～13.0g/L 。 琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖(agarose)：从琼脂(agar)中去掉杂质和能沉淀脂蛋白的琼脂果胶(agaropectin)后所得，是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质。 评价：电渗作用小，对蛋白质的吸附极微，分辩率和重现性均较好，电泳图谱清晰。 常用的浓度：0.5～1.0%。 商品化的琼脂糖凝胶板透明度好，散热均匀而且快，电泳重现性好，适当的条件可以保存半年。加之结合半干胶技术，电泳时可以不需要缓冲液，是目前自动化电泳系统最佳的介质。 （二）血清蛋白电泳的异常图谱 血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱 浆细胞病与M蛋白 血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱 浆细胞病与M蛋白 正常血清蛋白电泳上显示的宽γ区带主要成分:免疫球蛋白。 发生浆细胞病（plasma cell dyscrasia）时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或尿液中可出现结构单一的M蛋白，在蛋白电泳时呈现一个色泽深染的窄区带，此区带较多出现在γ或β区，偶见于α区。 血浆蛋白质及其异常分析 前清蛋白 （prealbumin，PA） 理化性质： 分子量5.4万，由肝细胞合成，其半衰期很 短，仅约12小时。 生理功能： 作为组织修补的材料和一种运载蛋白。 结合T4与T3，而对T3亲和力更大；PA与 视黄醇结合蛋白形成复合物，具有运载维 生素A的作用。 前清蛋白的临床评价 作为营养不良的指标，其评价标准是：PA 200mg/L～400mg/L为正常，100mg/L～150mg／L轻度缺乏，50mg/L～100mg／L中度缺乏，＜50mg／L严重缺乏。 ②作为肝功能不全的指标，在反映肝功能的损害与恢复方面的敏感性优于清蛋白。 ③在急性炎症、恶性肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，血清PA均迅速下降，PA是负性急性时相反应蛋白。 清蛋白 （albumin，Alb） 585个氨基酸残基组成 分子量66.2kD 含17个二硫键，是唯一不含糖的血浆蛋白质?！ 肝实质细胞合成 半寿期19d！ 血浆中含量最多的蛋白质 清蛋白的功能 （1）血浆中主要的载体蛋白：许多水溶性差的物质与清蛋白的结合而被运输，包括胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子（如Cu2+、Ni2+、Ca2+）、药物（如阿司匹林、青霉素等）。 （2）维持血浆胶体渗透压：血浆清蛋白丢失或浓度过低时，可引