牛血清白蛋白与萘酚绿B相互作用的研究.pdfVIP

困 2008，Vo1．25 No．1亿 与生物Z狸Ch emistrF Bioengineering 牛血清白蛋白与萘酚绿B相互作用的研究 董学芝。王明瑞。李 畅 (河南大学污染控制研究所，河南 开封 475001) 摘 要：研究了牛血清白蛋白与萘酚绿B的相互作用。结果发现，50％时在pH：1．64的Britton—Robinson缓冲溶 液中，萘酚绿B会发生褪色；随着牛血清白蛋白的加入，萘酚绿B褪色反应受到抑制，并且体系的吸光度与蛋白质的浓度 呈线性关系。对牛血清白蛋白与萘酚绿B作用机理进行了初步讨论，认为主要作用力为静电引力。 关键词：萘酚绿B；牛血清白蛋白；褪色 中圉分类号：0 657，3 文献标识码：A 文章编号：1672—5425(2OO8)01—0076—03 从不同角度考察染料分子与蛋白质的作用对于阐 扫描，得到吸收光谱。 明生物大分子与染料小分子相互作用的化学本质具有 1．2．2 加入BSA后，萘酚绿B的褪色反应 重要意义。许多研究表明当染料中加入蛋白质后，蛋 准确移取适量蛋白质标准溶液于25 mL的具塞 白质与染料小分子的作用会形成新的吸收峰l_1 ；也 比色管中，依次加入 1．5 raLpH一1．64的B—R缓冲溶 有研究表明在染料中加入蛋白质后，染料的吸收峰出 液、1．0 mL萘酚绿 B溶液、1．0 mLCTMAB溶液，用 现降低I4]。作者在此研究了牛血清白蛋与萘酚绿 B 蒸馏水稀释至刻度，摇匀。于5o℃恒温水浴中静置反 的相互作用，并对作用机理进行了初步探讨。 应2O rain，流水冷却 5 rain终止反应。以蒸馏水为参 比，用1 cm的比色皿于分光光度计于740 nm波长处 l 实验 测定其吸光度A。 1．1 主要试剂和仪器 2 结果与讨论 牛血清白蛋白(BSA，Serva公司)配制成 1．0× 10 tool·L 的标准溶液；萘酚绿B(NGB，天津化学 2。1 萘酚绿B褪色反应的吸收光谱(图1) 试剂三厂)配制成 1。0×10 mol·L 的水溶液；0．1 tool·L_。Britton—Robinson系列缓冲溶液(B—R缓冲 溶液)；1。0×10 mol·L-1十六烷基三甲基溴化铵 (CTMAB)，所有试剂均为分析纯。实验用水均为二 次蒸馏水。 LabTech-1000型紫外可见分光光度计，北京莱伯 泰科仪器有限公司；970CRT型荧光分光光度计，上海 z／ran 精密仪器厂；PHs_3CT型酸度计，上海雷磁仪器厂。 1．2 方法 a．2．0 mLNGB+1．5 mLB-R(pH=6．84)，2O℃ b．2．0 mLNGB+1．5 mLB-R(pH=1．64)，50V 1．2．1 萘酚绿B的褪色反应 图 1 萘酚绿B的吸收光谱 取两支25 mL的具塞比色管，在 1号管中加入 Fig．1 Absorption spectra of NGB 1．5 raLpH一6．84的B-R缓冲溶液、2．0 mL萘酚绿