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酪蛋接白的提取
酪蛋白的提取 实验目的 掌握一种提取酪蛋白的方法 掌握一种检测牛乳质量的方法 实验原理 酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，占乳蛋白的80%~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。它在牛乳中的含量约为35g/L，比较稳定，利用这一性质可以检测牛乳中是否掺假。 酪蛋白在其等电点时由于静电和为零，同种电荷间的排斥作用消失，溶解度很低，利用这一性质，将牛乳调到pH4.6，酪蛋白就可从牛乳中分离出来。酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被用来从酪蛋白粗制剂中将脂类杂志除去。 仪器、原料和试剂 仪器：温度计、布氏漏斗、pH试纸、抽滤瓶、电炉、烧杯、 量筒、表面皿、天平等 原料：市售牛乳 试剂：95%乙醇和乙醚 pH4.6乙酸钠缓冲液0.2mol/L 乙醇、乙醚混合液：乙醇：乙醚=1：1（体积比） 实验步骤 1、酪蛋白等电点沉淀 将100mL牛乳放到500mL烧杯中，加入至40℃左右的乙酸钠缓冲液，直到pH达4.6左右，用pH试纸或酸度剂调试。将上述悬浮液冷却至室温，然后放置5min，用细布过滤，收集沉淀。 2、除脂类杂质 将上述沉淀用少量水洗数次，然后悬浮于30mL95%的乙醇中。将此悬浮液倾入布氏漏斗中，抽滤除去乙醇溶液，再倒入乙醇-乙醚混合液洗涤沉淀两次，最后再用乙醚洗涤沉淀两次，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移去，在表面皿上摊开以除去乙醚，干燥后得到的是酪蛋白纯品。准确称重后，计算出每100mL牛乳所制备出的酪蛋白质量（g/100mL），并与理论产量（3.5g/100mL）相比较，求出实际获得百分率。 思考题 用乙醇、乙醇-乙醚和乙醚洗涤蛋白质的顺序是否可以变换？为什么？ 试设计一个利用蛋白质其他性质提取蛋白质的实验？ * *
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