第一章节及09 物料处理与培养基制备.pptVIP

第一章节及09 物料处理与培养基制备.ppt

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第一章节及09 物料处理与培养基制备

生物工程设备 Biological Engineering Equipment 48学时,3学分,考试 生物工程设备是生物工程技术和化学工程与设备交叉的学科,主要介绍在生物工程生产过程中常用设备的结构、特点、原理、设计、计算、选型及保养. 生物工程设备 曾用名: 工业生物技术装备 工业生化设备 生化设备 抗生素生产设备 发酵设备 参考书: (1)《生物工程设备》,梁世中 主编 中国轻工业出版社. (2)《发酵设备》高孔荣 编著 中国轻工业出版社. (3)《生物加工过程与设备》,郑裕国等 ,化学工业出版社. 主要内容讲课学时 第一章 培养基灭菌的设备 4学时 第二章 压缩空气预处理及除菌设备 6学时 第三章 生物反应器 14学时 第四章 液-固分离设备 6学时 第五章 萃取设备 6学时 第六章 蒸发与结晶设备 4学时 第七章 生物产品干燥设备 6学时 复习与机动 2学时 总计48学时 考核: 平时成绩20分. 出勤、作业、小考、笔记、课堂表现等。 期末闭卷考试 成绩80分. 第一章 培养基灭菌的设备 第一节 培养基的灭菌方法 ※第二节 培养基实罐灭菌 ※第三节 培养基连续灭菌 第一节 培养基的灭菌方法 采用高温蒸气灭菌---湿热灭菌 1. 工程上无菌标准 灭菌对象 耐热杆菌芽孢120℃,20-30分钟 培养基初始污染度 104~108(个/ml): 2×107个/ml 无菌标准 NS=10-3 即1/1000的失败机率 2. 对数残留定律 微生物死亡速率与任一瞬间残存的活菌数成正比——对数残留定律 即 死亡速率常数K(热致死反应速率常数) K是表达微生物耐热性的特征常数 ,单位是min-1,与微生物的种类和灭菌温度有关。K越小,微生物越耐热。 开始灭菌时,t = 0,培养基中的活菌数量为N 0 ;当t = t 时,N = Nt 理论灭菌时间 3.死亡的速度常数K与温度关系 对于某一耐热芽孢杆菌 A=1.34x1036(1/S) △E = 67930卡/克分子 灭菌温度的选择 式中 ΔE为菌体死亡反应的活化能(J/mol),它是菌体死亡反应的特征常数,所以,不同菌其热死亡反应的ΔE不同。 灭菌时杀死微生物的ΔE大于培养基成分破坏的 ΔE` ,因此,随温度的上升,比死亡速率常数增加倍数要大于培养基成分分解的速率。 4.灭菌的温度和时间对营养成分破坏的影响 灭菌目的:灭菌后的培养基无杂菌,营养成分破坏少。 培养基灭菌要解决的问题是: 灭菌的温度 灭菌的时间 5.影响培养基灭菌的其他因素 培养基成分、pH值、培养基中的颗粒、泡沫 第二节 培养基实罐灭菌 分批灭菌(实消、实罐灭菌) 连续灭菌(连消) 空罐灭菌(空消) 1、分批灭菌(实消、实罐灭菌) 将配制好的培养基放在发酵罐、加压灭菌锅或其它容器中,通入水蒸汽将培养基和所用设备一起灭菌的操作过程。 保温阶段:灭菌的重要阶段。习惯上, 50立方米以下的,保温时间看作是灭菌时间。 从各路通入蒸汽(进气口、排料口、取样口),温度升到120-130℃,保温30min 保温中,应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽,而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽,不留死角,灭菌彻底。 降温阶段:依次关闭各排汽、进汽阀门,待罐内压力低于空气压力后,向罐内通入无菌空气,在夹套或蛇管中通冷水降温,防止罐体负压变形。 3、分批灭菌的注意事项 1)各路蒸汽进口要畅通,防止短路逆流;罐内液体翻动要剧烈,使物料达到均一的灭菌温度。 2)排气量不宜过大,以节约蒸汽。 3)灭菌将要结束时,应立即引入无菌空气以保持罐压,然后开夹套或蛇管冷却,以避免罐压迅速下降产生负压而吸入外界空气,或引起发酵罐破坏。 4)在引入无菌空气前,罐内压力必须低于过滤器压力,否则培养基将倒流入过滤器。 4、培养基实罐灭菌的质量优劣判别的标准 1) 培养基灭菌后达到无菌的要求; 2) 营养成分破坏少; 3) 灭菌培养基体积与计料体积相符; 4) 泡沫要少。 5、分批灭菌(实消)特点: 1、不需要专门的灭菌设备,投资少,设备简单。 2、灭菌效果可靠,对蒸汽的要求低,一般在(0.3-0.4) ×MPa 3、中小型发酵罐常用的灭菌方法。 4、灭菌后培养基质量比较差,营养损失大。 5、罐的利用率低。 第三节 培养基的连续灭菌 连续灭菌(连消) 培养基在发酵罐外连续地加热、保温、冷却,然后进入发酵罐。 连续灭菌与分批灭菌灭菌曲线图 1.培养基连续

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