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课题:基因工程的基本操作程序(第一课时)主备人:审核人:授课人:使用时间:年月日【学习目标】1.说出基因工程基本操作程序。2.掌握获取目的基因的方法。3.基因组文库与cDNA文库的区别。4.PCR技术。【重点难点】重点:1.掌握获取目的基因的方法。 2.基因组文库与cDNA文库的区别。3.PCR技术。难点:1. 掌握获取目的基因的方法。2. PCR技术。【自主学习】一、基因工程的基本操作程序写出左图各字母所代表的内容A:B:C:D:E:F:G: H:二、目的基因的获取:(1)目的基因主要是,也可以是一些具有。 (2)目的基因的来源。(3)获取目的基因的方法:①②③(一)从基因文库中获取目的基因(1)构建基因文库时需要对DNA分子进行切割和连接所使用的酶分别是_和。(2)基因组文库包含了一种生物的;是通过酶获得的;cDNA文库包含了一种生物的的,是通过获得的。(二)利用PCR技术扩增目的基因PCR扩增目的基因的原理是,前提条件是,PCR所使用的酶是,该酶具有什么特点?。过程:第一步:加热至90~95℃;第二步:冷却到55~60℃,;第三步:加热至70~75℃,从引物起始互补链的合成。(三)人工合成目的基因当基因比较小,又已知,可以通过DNA合成仪用人工合成。【问题生成】【师生互动,问题探讨】1.PCR技术与DNA复制有什么区别?项目DNA复制PCR技术不同点场所解旋酶引物合成子链温度特点循环次数产物相同点2.构建基因文库时用到哪些工具?3.如何利用mRNA构建生物的cDNA?【课后小结与反思】基因文库的构建过程【自我检测】1.正确表示基因工程顺序操作的四个步骤的是 ( )A.获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测与鉴定B.目的基因的检测与鉴定→获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞C.获取目的基因→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定D.基因表达载体的构建→获取目的基因→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定2.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是( ) ①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④ B.①②③ C.②③④D.②③3. PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )①目的基因 ②ATP ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体A.①②③④ B.②③④⑤C.①③④⑤ D.①②③⑥4.已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指。如果该线性DNA分子上有3个酶切位点都被该酶切断,则会产生四个不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶切割后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是A.3 B.4 C.9 D.125.有关基因工程的叙述中,错误的是( )A.DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来B.限制性内切酶用于目的基因的获得C.目的基因须由载体导入受体细胞D.人工合成目的基因不用限制性内切酶6.右图为用于基因工程的一个质粒示意图。用EcoRI限制酶切割目的基因和该质粒,再用DNA连接酶连接形成重组质粒,然后导入大肠杆菌,最后将大肠杆菌放在四种培养基中培养:a—无抗生素的培养基,b—含四环素的培养基,c—含氨苄青霉素的培养基,d—含四环素和氨苄青霉素的培养基。含重组质粒的大肠杆菌能生长的是()A.a B.a和c C.a和b D.b和c7.下列不属于获取目的基因的方法的是( )A.利用DNA连接酶复制目的基因B.利用DNA聚合酶复制目的基因C.从基因文库中获取目的基因D.利用PCR技术扩增目的基因8.切取牛的生长激素和人的生长激素基因,用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中,从而获得了“超级鼠”,此项技术遵循的原理是A.基因突变:DNA→RNA→蛋白质B.基因工程:RNA→RNA→蛋白质C.细胞工程:DNA→RNA→蛋白质D.基因工程:DNA→RNA→蛋白质9.(2014.广东卷)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如图14所示,下列叙述正确的是()A、过程①需使用逆转录酶B、过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C、过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D、过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞10.基因工程中目的基因的分离是操作的关键。下面甲、乙图表示从真核生物细胞中获取目的基因的两种方法,请回答下列问题:⑴在甲图中,a过程是在??????????酶的作用下完成的。如果用该类酶中的一种,不一定能获取
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